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VWR® General Purpose Water Baths

公司名称: VWR
产品编号: 89501-468
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Expansion of Airway Basal Cells and Generation of Polarized Epithelium
Author:
Date:
2018-06-05
[Abstract]  Airway basal stem cells are the progenitor cells within the airway that exhibit the capacity to self-renew and give rise to multiple types of differentiated airway epithelial cells. This stem cell-derived epithelium displays organized architecture with functional attributes of the airway mucosa. A protocol has been developed to culture and expand human airway basal stem cells while preserving their stem cell properties and capacity for subsequent mucociliary differentiation. This achievement presents a previously unrealized opportunity to maintain a durable supply of progenitor cells derived ... [摘要]  气道基底干细胞是气道内的祖细胞,表现出自我更新的能力并产生多种类型的分化的气道上皮细胞。这种干细胞来源的上皮细胞显示出具有气道粘膜功能属性的有组织的结构。已经开发了一种方案来培养和扩展人气道基底干细胞,同时保持其干细胞特性和后续粘液分泌的能力。这项成就提供了一个以前未实现的机会,以保持源自健康供体的祖细胞的持久供应,以分化为用于基于细胞和分子的研究的人原发性气道上皮。此外,基底干细胞可以从患有特定气道疾病的患者(例如囊性纤维化)中收集,从而能够在适当的气道粘膜环境下研究疾病特异性细胞的潜在改变的行为。在这里,我们详细描述了一系列气道基底干细胞系列扩增的方案,以实现几乎无限制的气道基底细胞的生成,这些细胞可以储存并随时用于随后的培养和分化。此外,我们描述了气液基底干细胞在空气 - 液体界面处的可渗透Transwell过滤器上的培养和分化,以创建功能性粘膜睫毛伪分层极化气道上皮粘膜。

【背景】气道疾病建模和药物发现已经从在气液界面(ALI)的可渗透Transwell过滤器上生长的原代呼吸道上皮培养物的开发和使用中获益。与永生化细胞系相比,该模型具有几个优点,即原代上皮细胞可以分化成具有多种上皮细胞类型(包括纤毛,浆膜和基底细胞)的气道粘膜,并且它们的排列在体内是相当反映的蜂窝组织。主要的ALI模型表现出功能性微生理过程,包括跳动纤毛和分泌粘液的能力,这些特征在细胞系衍生的上皮单层中显着不存在。此外,原代细胞不依赖于人工永生化或转化,因为细胞系来源的上皮细胞确实存在,因此不受细胞系中可能发生的错误信号传导的阻碍,这可能会错误地表示气道上皮中发生的过程。尽管有这些显着的限制,永生化细胞系被广泛用于模拟和研究气道上皮细胞,因为原发性气道上皮细胞存在自己的一系列挑战。原代上皮细胞在传代数次后无法复制,必须连续收获并分离以完成每组研究。另外,改变或缺失感兴趣基因表达的分子生物学技术难以实现,并且与原代上皮细胞一起维持。这些缺点造成成本和技术障碍,阻碍了原发性ALI培养物的广泛使用,尽管它们在调查气道粘膜方面有明显优势。 ...

Infection of Caenorhabditis elegans with Vesicular Stomatitis Virus via Microinjection
Author:
Date:
2017-11-20
[Abstract]  Over the past 15 years, the free-living nematode, Caenorhabditis elegans has become an important model system for exploring eukaryotic innate immunity to bacterial and fungal pathogens. More recently, infection models using either natural or non-natural nematode viruses have also been established in C. elegans. These models offer new opportunities to use the nematode to understand eukaryotic antiviral defense mechanisms. Here we report protocols for the infection of C. elegans with a non-natural viral pathogen, vesicular stomatitis virus (VSV) through ... [摘要]  在过去的15年中,线虫自由生活已经成为探索真核细菌和真菌病原体真核免疫的重要模型系统。 最近,使用天然或非天然线虫病毒的感染模型也已经在C中建立。线虫。 这些模型提供了使用线虫了解真核抗病毒防御机制的新机会。 在这里,我们报告感染的协议。 线虫与非天然病毒病原体,水泡性口炎病毒(VSV)通过显微注射。 我们还描述了编码荧光或萤光素酶报告基因的重组VSV毒株如何与简单的基于荧光,存活和发光的分析结合使用来鉴定宿主遗传背景,并对病毒感染有不同的易感性。

【背景】由于它的遗传易用性,体积小,文化价廉,透明的身体,自由生活的线虫秀丽隐杆线虫作为模式生物提供了许多优点。此外,C的易感性。线虫对人类多种细菌和真菌病原体的作用使得这种蠕虫成为研究微生物发病机制的有吸引力的系统(Zhang和Hou,2013; Cohen and Troemel,2015)。最近,发现了正义ssRNA奥赛病毒(OV)作为第一种天然的病毒病原体。线虫已经提示使用OV- C。 elegans 模型来定义线虫抗病毒防御机制(Felix等人,2011; Gammon,2017)。这些研究已经证明了线虫抗病毒RNA干扰途径组分如Dicer相关解旋酶1(DRH-1)在限制病毒复制中的明确作用(Ashe等人,2013)。

为了补充OV模型系统,我们最近报道了新一代病毒的产生。使用反义ssRNA水泡性口炎病毒(VSV)(Gammon等人,2017)的线虫模型。用VSV感染野生型(N2)蠕虫是致命的,虽然抗病毒反应(例如突变体,drh-1突变体)突变体缺陷会更快地感染感染(Gammon ...

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