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Agarose

琼脂糖

公司名称: Thermo Fisher Scientific
产品编号: 10766834
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Deflagellation and Regeneration in Chlamydomonas
Author:
Date:
2014-06-20
[Abstract]  Eukaryotic cilia/flagella are one of the only cellular structures that can be removed without injuring cells, can be highly purified for biochemical analysis, and, in many cells, can be completely reassembled within 90 minutes. Following amputation, the expression of many flagellar genes is up-regulated, and many are packaged and associated with intraflagellar transport (IFT) particles for transport to flagellar bases and into growing flagella. Studies of deciliation and ciliary growth provide insight to mechanisms that regulate microtubule assembly and length, mechanisms that regulate the ... [摘要]  真核纤毛/鞭毛是唯一的细胞结构之一,其可以被去除而不伤害细胞,可以被高度纯化用于生化分析,并且在许多细胞中,可以在90分钟内完全重新组装。截肢后,许多鞭毛基因的表达被上调,并且许多被包装和与用于运输到鞭毛基部和进入生长鞭毛的鞭毛内转运(IFT)颗粒相关联。脱落和睫毛生长的研究提供了调节微管装配和长度,调节可溶性细胞质蛋白质运输到睫状隔室和它们装配到微管中的机制以及调节膜蛋白和脂质运输到质膜的机制的机制或睫状基质及其进入和离开纤毛的运动。这些对于动力和信号转导是重要的。
已经开发了许多细胞的脱落方法,并且大多数需要细胞外钙离子和调节微管切断的信号通路的激活(Quarmby,2009)。脱屑发生在基体的远端,并且一旦轴突断裂,膜结合和基底体开始再生纤毛。
衣藻是治疗睫状体再生的理想生物体。细胞容易且廉价地培养,鞭毛截肢和再生在群体中的所有细胞中是均匀的,并且生长可以通过用装备有相差显微镜和40倍物镜的观察固定或活细胞来测定。使用固定在琼脂糖中的麻痹突变体可以观察对单个活细胞的鞭毛再生。因为絮凝使细胞完整,所以可以纯化释放的鞭毛而不污染细胞碎片。最可靠的脱胶和再生方法是由参考文献5开发的pH休克方法(也参见参考文献4和11)。其他方法由Quarmby,(2009)综述。 pH休克方法主要用于衣藻,但可用于四膜虫的纤毛脱落和再生(Gaertig等人,2013)。 ...

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