| Phototaxis Assay for Chlamydomonas reinhardtii
|
|
Author:
Date:
2017-06-20
[Abstract] Phototaxis is a behavior in which organisms move toward or away from the light source (positive or negative phototaxis, respectively). It is crucial for phototrophic microorganisms to inhabit under proper light conditions for phototaxis. The unicellular green alga Chlamydomonas reinhardtii rapidly changes its swimming direction upon light illumination, and thus is a nice model organism for phototaxis research. Here we show two methods to assay Chlamydomonas phototaxis; one is a quick, easy and qualitative analysis, so-called the dish assay; and the other is a quantitative ...
[摘要] 光趋向性是一种生物朝向或远离光源（分别为正或负光趋势）移动的行为。 光合微生物在光照条件适宜的条件下居住是至关重要的。 单细胞藻类莱茵衣藻在光照下迅速改变其游泳方向，因此是光线研究的一个很好的模型生物。 我们在这里展示了两种测定衣藻感染的方法; 一个是快速，容易和定性的分析，所谓的盘测定; 另一个是定量单细胞分析
【背景】单细胞藻类莱茵衣藻被用作各种研究领域的示范生物，包括微生物光合作用，光合作用和睫毛/鞭毛运动（Hegemann and Berthold，2009）。衣藻细胞在其眼窝感觉到光，观察细胞器作为位于细胞赤道附近的橙色斑点。眼窝包含位于细胞膜中的光感受器蛋白质通道视紫质和富含类胡萝卜素的颗粒层，其作用于光反射器之后的通道视紫质。由于它们的相对位置，眼睛受到高度定向的光感受，细胞可以准确地检测光照的方向（Foster和Smyth，1980; Ueki等，2016）。在光接收时，两个鞭毛改变它们的跳动平衡，并且细胞改变其游泳方向朝向或远离光源。
衣原体光镜方向（或“符号”）由细胞还原氧化态调节，其受细胞代谢如光合作用和呼吸活动的影响（Wakabayashi等，2011）。因此，光照标记间接地反映了体内的这些活性。例如，显示快速光敏反应的突变体已被证明具有高的光合活性（Kim等，2016）。此外，为了调节鞭毛打击细胞的光动力转动，鞭毛动力蛋白应严格调节（Kamiya和Witman，1984; ...
|
|
|
| Electron Paramagnetic Resonance (EPR) Spectroscopy to Detect Reactive Oxygen Species in Staphylococcus aureus
|
|
Author:
Date:
2015-09-05
[Abstract] Under aerobic conditions, Staphylococcus aureus (S. aureus) primarily metabolizes glucose to acetic acid. Although normally S. aureus is able to re-utilize acetate as a carbon source following glucose exhaustion, significantly high levels of acetate in the culture media may not only be growth inhibitory but also potentiates cell death in stationary phase cultures by a mechanism dependent on cytoplasmic acidification. One consequence of acetic acid toxicity is the production of reactive oxygen species (ROS). The present protocol describes the detection of ROS in S. ...
[摘要] 在有氧条件下，金黄色葡萄球菌（金黄色葡萄球菌）主要将葡萄糖代谢为乙酸。虽然通常是。金黄色葡萄球菌能够在葡萄糖耗竭之后再利用乙酸盐作为碳源，培养基中显着高水平的乙酸盐不仅可以是生长抑制性的，而且还可以通过依赖于细胞质的机制增强稳定期培养物中的细胞死亡酸化。乙酸毒性的一个后果是活性氧（ROS）的产生。本协议描述了ROS的检测。金黄色葡萄球菌通过电子顺磁共振（EPR）光谱法进行细胞死亡。使用1-羟基-3-甲氧基羰基-2,2,5,5-四甲基吡咯烷（CMH）作为细胞可渗透的自旋探针，我们证明检测由细菌产生的各种氧自由基。虽然标准化了 s。 aureus ，这里描述的方法应该很容易适应其他细菌物种。该协议改编自托马斯（Thomas）等人（2014）和托马斯（Thomas）等人（2010）。
|
|
|