| RNA ImmunoGenic Assay: A Method to Detect Immunogenicity of in vitro Transcribed mRNA in Human Whole Blood
|
|
Author:
Date:
2020-12-20
[Abstract] The mRNA therapeutics is a new class of medicine to treat many various diseases. However, in vitro transcribed (IVT) mRNA triggers immune responses due to recognition by human endosomal and cytoplasmic RNA sensors, but incorporation of modified nucleosides have been shown to reduce such responses. Therefore, an assay signifying important aspects of the human immune system is still required. Here, we present a simple ex vivo method called ‘RNA ImmunoGenic Assay’ to measure immunogenicity of IVT-mRNAs in human whole blood. Chemically modified and unmodified mRNA ...
[摘要] [摘要] mRNA疗法是治疗多种疾病的新型药物。然而，我Ñ体外转录（IVT）的mRNA触发由于人类内体和细胞质RNA传感器，但是修饰的核苷的掺入识别的免疫应答已经示出吨ö减少此类反应。牛逼herefore ，测定标志着重要的环节人体免疫系统仍然需要。这里，我们提出一个简单的离体称为“RNA方法免疫ģ ENIC测定”测量的IVT-mRNA的免疫原性小号在人全血。将化学修饰和未修饰的mRNA与转染试剂（TransIT ）复合，并在人全血中共同孵育。特异性细胞因子测定（TNF- α ，INF- α ，INF- γ ，IL-6和IL-12p70的），使用的ELISA。进行qPCR分析以揭示特异性免疫途径的激活。所述RNA免疫ģ ENIC测定提供小号的简单且快速的方法来检测供体特异性-针对mRNA的治疗剂的免疫应答。
图形摘要：
RNA免疫基因测定的示意图
[背景] mRNA治疗是基因治疗的重要一类（Sahin等，2014 ；Antony等，2015 ...
|
|
|
| Analysis of the Effect of Sphingomyelinase on Rubella Virus Infectivity in Two Cell Lines
|
|
Author:
Date:
2018-09-05
[Abstract] Rubella is a mildly contagious disease characterized by low-grade fever and a morbilliform rash caused by the rubella virus (RuV). Viruses often use cellular phospholipids for infection. We studied the roles of cellular sphingomyelin in RuV infection. Treatment of cells with sphingomyelinase (SMase) inhibited RuV infection in rabbit kidney-derived RK13 cells and African green monkey (Cercopithecus aethiops) kidney-derived Vero cells. Our data further demonstrated that RuV used cellular sphingomyelin and cholesterol for its binding to cells and membrane fusion at the step of virus ...
[摘要] 风疹是一种轻度传染性疾病，其特征是低风热和由风疹病毒（RuV）引起的麻疹样皮疹。 病毒通常使用细胞磷脂进行感染。 我们研究了细胞鞘磷脂在RuV感染中的作用。 用鞘磷脂酶（SMase）处理细胞抑制兔肾衍生的RK13细胞和非洲绿猴（ Cercopithecus aethiops ）肾源性Vero细胞中的RuV感染。 我们的数据进一步证明RuV在病毒进入的步骤中使用细胞鞘磷脂和胆固醇来结合细胞和膜融合。 描述了我们的测定的详细方案，其评估了SMase处理对RK13和Vero细胞中RuV感染性的影响。
【背景】风疹病毒（RuV）是一种正链RNA病毒，属于 Togaviridae 家族中的 Rubivirus 属。该家族有两个属， Rubivirus 和 Alphavirus 。风疹病毒是属的鞋底构件的风疹病毒，而许多病毒，例如塞姆利基森林病毒（SFV）和辛德毕斯病毒（SINV），是归类于甲病毒属。 RuV是风疹和先天性风疹综合征（CRS）的致病因子。风疹的特征是低烧，麻疹样皮疹和淋巴结肿大。它通常是一种轻微的疾病。然而，CRS是一种严重的疾病。 CRS导致在怀孕早期患有风疹的母亲所生的新生儿出现多器官缺陷。白内障，感音神经性听力损失和心血管缺陷在CRS中很常见。
以前的研究表明，细胞膜脂质作为RuV感染的结合或进入因子（Mastromarino ...
|
|
|
| Isolation and Maintenance of Striatal Neurons
|
|
Author:
Date:
2018-04-20
[Abstract] Primary cultures of murine striatal neurons are widely used to explore cellular mechanisms in neurobiology, including brain diseases. Here we describe a detailed and standardized protocol to dissect and culture embryonic murine striatal neurons GABA-positive/DARPP-32-positive for 12 days in vitro, when they show good neuronal cell connectivity and the presence of dendritic spines, which reflects the maturation of the network.
[摘要] 小鼠纹状体神经元的原代培养物被广泛用于探索神经生物学中的细胞机制，包括脑部疾病。 在这里，我们描述了一个详细和标准化的协议解剖和文化胚胎小鼠纹状体神经元GABA阳性/ DARPP-32阳性12天体外，当他们显示良好的神经元细胞连接性和存在的树突 刺，反映了网络的成熟。
【背景】纹状体是运动和奖励系统的重要组成部分，纹状体神经元的功能障碍可导致各种神经元疾病，从强迫性行为（Welch et al。，2007）到神经退行性疾病，如在亨廷顿病中观察到的（Reiner等，1988）。因此，一个良好建立的纹状体文化可能是一个很有价值的研究这些和其他条件的模型。成年纹状体中的主要神经元亚型是中型多刺投射神经元（MSNs），其占所有纹状体神经元的约95％并使用抑制性递质γ-氨基丁酸（GABA）。它们具有中等大小的细胞体，复杂的树突状乔木和高密度的树突棘，可同时接受谷氨酸能和多巴胺输入。其余5％的神经元由GABA能神经间神经元组成（Graveland和DiFiglia，1985; ...
|
|
|