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Author:
Date:
2017-11-20
[Abstract] Olive (Olea europaea L.) is one of the most important oil crops in the Mediterranean basin. Biotechnological improvement of this species is hampered by the recalcitrant nature of olive tissue to regenerate in vitro. In previous investigations, our group has developed a reliable Agrobacterium-mediated transformation protocol using olive somatic embryos as explants (Torreblanca et al., 2010). Embryogenic cultures derived from radicles of matured zygotic embryos are infected with Agrobacterium tumefaciens, AGL1 strain, containing a binary plasmid with ...
[摘要] 橄榄油（Olea europaea L.）是地中海盆地最重要的石油作物之一。生物技术的改善受到橄榄组织在体外再生的顽固性质的阻碍。在以前的研究中，我们小组开发了一个可靠的土壤杆菌介导的转化方案，使用橄榄体细胞胚作为外植体（Torreblanca et al。，2010）。含有具有感兴趣基因和nptII选择基因的二元质粒的根瘤农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）AGL1菌株感染源自成熟合子胚胎胚根的胚性培养物。经过细致的选择程序，使用补充巴龙霉素的固体和液体培养基进行，建立推定的转化系。其转基因性质的初步确认是通过PCR扩增进行的。之后，可以通过有效的再生方案获得植物，其主要特征是使用低离子强度的矿物制剂，在液体培养基中用于培养物同步的阶段以及使用半渗透性乙酸纤维素膜进行胚胎成熟（Cerezo et al。 ，2011）。转基因插入的最终确认通过Southern或Northern分析使用再生植物的叶样品进行。
【背景】由Torreblanca等人开发的协议。 （2010）与Rugini等人（2000）开发的先前的橄榄转化协议有所不同，主要是外植体的种类，土壤杆菌菌株及其选择方法。 Rugini等人（2000）使用胚性质量作为外植体，将其在LBA4404农杆菌菌株的细菌悬浮液中温育48小时。感染后，将外植体在水中漂洗并在补充有250mg ...
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