30% (w/v) Acrylamide/Bis mixed solution (37.5:1)

公司名称: Wako Pure Chemical Industries

产品编号: 018-25625

Acidified Blue Ink-staining Procedure for the Observation of Fungal Structures Inside Roots of Two Disparate Plant Lineages

Jill Kowal, Elena Arrigoni and Sophie Lane

Published online: 2020-10-20

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Determination of H⁺-ATPase Activity in Arabidopsis Guard Cell Protoplasts through H⁺-pumping Measurement and H⁺-ATPase Quantification

Author:

Shota Yamauchi and Ken-ichiro Shimazaki,

Date:

2017-12-20

[Abstract] The opening of stomata in plants in response to blue light is driven by the plasma membrane H⁺-ATPase in guard cells. To evaluate the activation of the H⁺-ATPase in vivo, we can use H⁺-pumping by guard cells in response to blue light and fusicoccin. To do this, it is required to prepare a large amount of guard cell protoplasts and measure H⁺-pumping in the protoplasts. It is also necessary to determine the protein amount of H⁺-ATPase. In this protocol, we describe the procedures required for these preparations and measurements. [摘要] 响应蓝光的植物气孔的开放是由保卫细胞中的质膜H + -ATPase驱动的。为了评价体内H + -ATP酶的激活，我们可以使用H + +保卫细胞对蓝光的响应，fusicoccin。为此，需要制备大量的保卫细胞原生质体，并测量原生质体中的H + - 抽吸。还需要确定H + -ATP酶的蛋白质量。在这个协议中，我们描述了这些准备和测量所需的程序。

【背景】响应于蓝光的气孔的开放是由穿过保卫细胞质膜上的H +介导的膜超极化驱动的（Assmann等，1985; Shimazaki等人，1986），并且是由质膜H + -ATP酶引起的（Kinoshita和Shimazaki，1999）。 H + -ATP酶在膜上产生电化学梯度，并提供植物细胞中许多次级运输所需的能量。然而，测量体内H + -ATP酶活性并不容易。利用保卫细胞的蓝光敏感特性，我们的方法可以将体内H +泵送作为体内测量H + + 使用拟南芥保卫细胞原生质体的ATP酶活性（Ueno等人，2005）。与通过蛋白质印迹（Yamauchi等人，2016）的Hβ+ -ATPase定量一起，该方法允许比较Hβ+ -ATPase活性不同的条件或突变背景。

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30% (w/v) Acrylamide/Bis mixed solution (37.5:1)

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