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Anti-ribosomal P antibody

公司名称: ImmmunoVision
产品编号: HPO-0100
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The RiboPuromycylation Method (RPM): an Immunofluorescence Technique to Map Translation Sites at the Sub-cellular Level
Author:
Date:
2018-01-05
[Abstract]  While isotopic labeling of amino acids remains the reference method in the field for quantifying translation rate, it does not provide any information on spatial localization of translation sites. The rationale behind developing the ribopuromycylation method (RPM) was primarily to map translation sites at the sub-cellular level while avoiding detection of newly synthesized proteins released from ribosomes. RPM visualizes actively translating ribosomes in cells via standard immunofluorescence microscopy in fixed and permeabilized cells using a puromycin-specific monoclonal antibody to detect ... [摘要]  尽管氨基酸的同位素标记仍然是用于定量翻译速率的领域中的参考方法,但是其不提供关于翻译位点的空间定位的任何信息。 开发ribopuromycylation方法(RPM)的基本原理主要是在亚细胞水平上绘制翻译位点,同时避免检测从核糖体释放的新合成的蛋白质。 RPM通过使用嘌呤霉素特异性单克隆抗体的固定的和透化的细胞中的标准免疫荧光显微镜可视化主动翻译细胞中的核糖体以检测捕获在用链延长抑制剂处理的核糖体上的嘌呤化新生链。

【背景】几十年来,氨基酸的同位素标记被认为是研究蛋白质翻译的金标准。虽然这种方法已被证明是非常准确的评估翻译率,它没有提供翻译核糖体的位置信息。最近,氨基酸类似物使荧光检测新生链(Dieterich等人,2007)。然而,几乎所有检测到的信号都来自核糖体释放的多肽。我们最初的想法是开发一种方法来标记新生链,同时还束缚于翻译核糖体。

嘌呤霉素(PMY)是一种氨基糖苷类抗生素,模拟带电荷的tRNA Tyr并掺入核糖体A位点。因此,PMY通过核糖体催化 - ...

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