| Optimized Immunostaining of Embryonic and Early Postnatal Mouse Brain Sections
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Author:
Date:
2021-01-05
[Abstract] The mammalian neocortex, the outer layer of the cerebrum and most recently evolved brain region, is characterized by its unique areal and laminar organization. Distinct cortical layers and areas can be identified by the protein expression of graded transcription factors and molecular determinants that define the identity of different projection neurons. Thus, specific detection and visualization of protein expression is crucial for assessing the identity of neocortical neurons and, more broadly, for understanding early and late developmental mechanisms and function of this complex system. ...
[摘要] [摘要]哺乳动物的新皮层是大脑的外层，也是最近进化的大脑区域，其特征在于其独特的区域和层状组织。不同的皮质层和区域可以通过分级转录因子的蛋白质表达和定义不同投射神经元身份的分子决定簇来鉴定。因此，蛋白质表达的特异性检测和可视化对于评估新皮层神经元的身份至关重要，更广泛地来说，对于理解这个复杂系统的早期和晚期发育机制和功能至关重要。一些 存在免疫染色/免疫荧光方法来检测蛋白质表达。已发布的方案在细节方面有所不同，可能会影响免疫荧光的最终结果。在这里，我们提供了详细的协议，适用于低温恒温器薄切片和厚振动切片器薄切片，该协议已成功地开发了针对新皮质发育关键分子的抗体。从早期的技术措施测距的大脑采集到的图像分析和统计，我们包括有关样品包容和每一个细节部分ING，幻灯片存储和旨在减少非特异性背景最佳抗体稀释。在实验室中常规使用的，我们的背景优化的免疫染色协议允许区域的有效检测-和层-独特新皮层投射神经元的特定的分子决定因素。
图形摘要：
优化的小鼠脑切片免疫染色方案的工作流程图。一。一个流程图的不同步骤的优化免疫染色协议薄低温恒温器和厚振动切片。乙。例如，用于在薄冠状免疫染色对SATB2和CTIP2部（20 μ ...
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| Mouse Satellite Cell Isolation and Transplantation
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Author:
Date:
2018-01-20
[Abstract] Satellite cell (SC) transplantation represents a powerful strategy to investigate SC biology during muscle regeneration. We described here a protocol for SC isolation from green fluorescent protein (GFP)-expressing mice and their transplantation into murine muscles. This procedure was originally used to assess the effects of the hormone unacylated ghrelin on muscle regeneration, in particular evaluating how the increase of unacylated ghrelin in the recipient muscle affected the engraftment of donor SCs (Reano et al., 2017).
[摘要] 卫星细胞（SC）移植代表了肌肉再生期间SC生物学研究的强大策略。 我们在这里描述了从绿色荧光蛋白（GFP）表达的小鼠和他们的小鼠肌肉移植SC分离的协议。 该程序最初用于评估激素非酰化生长素释放肽对肌肉再生的影响，特别是评估受体肌肉中未酰化的生长素释放肽的增加如何影响供体SC的植入（Reano等人，2017年）。
【背景】由分化的肌纤维组成的骨骼肌可以在受伤时再生。肌肉再生依赖于居住在肌肉纤维基底层之下的称为卫星细胞（SC）的静止驻留干细胞群（Mauro，1961）。受伤后，SC经历激活，广泛的增殖，分化和融合，最终修复或替换受损的肌纤维（Collins等人，2005）。
由于移植的成肌细胞可以与宿主成肌细胞融合，因此SC的移植被认为是杜氏肌营养不良症（DMD）的潜在疗法多年的时间，这提示了在缺陷纤维中功能性修复的可能性（Partridge ...
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