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Date:
2018-02-05
[Abstract] The retina is sensitive for light damages, because of direct light exposure, especially intense blue and UV light, which increase level of ROS and other toxic phototransduction products in photoreceptor cells. In our previous work (Damulewicz et al., 2017a and 2017b), we used 8-oxo-deoxyguanosine (8-OHdG) as a marker for oxidative stress to investigate the role of heme oxygenase in DNA protection against UV light. In this protocol, we showed how to determine the level of DNA damages in the retina using immunohistochemical staining.
[摘要] 视网膜对光损伤敏感，因为直接光照，尤其是强烈的蓝光和紫外光，这增加了光感受器细胞中ROS和其它有毒光转导产物的水平。 在我们以前的工作（Damulewicz等人，2017a和2017b）中，我们使用8-氧代 - 脱氧鸟苷（8-OHdG）作为氧化应激的标记来研究血红素加氧酶在DNA保护中的作用 防紫外线。 在这个协议中，我们展示了如何使用免疫组织化学染色来确定视网膜中DNA损伤的水平。
【背景】脱氧核糖核酸（DNA）是所有生物体的必需分子。它含有遗传密码，其中含有对生物体结构和代谢所必需的蛋白质和其他分子的说明。 DNA由两条核苷酸链组成。每种核苷酸是四种类型的核苷碱基（胞嘧啶，鸟嘌呤，腺嘌呤和胸腺嘧啶），脱氧核糖和磷酸酯基团中的一种。 DNA结构中的物理和化学变化被归类为DNA损伤。它包括一个或两个DNA断裂链，缺少核碱基的核苷酸或化学变化。损坏可能是由于环境因素诱导，如化学物质或UV光暴露，或在代谢过程，其产生活性氧，活性氮物质，反应性羰基物质和烷化剂（德邦特和van Larebeke，2004）的结果。
其中最常见的DNA损伤是-8-氧代脱氧鸟苷（8-OHdG的），所有这些是由活性氧物种的DNA氧化的产物，它作为氧化应激（德索萨-Pinto的等的标记。 ，2001，Swenberg等人，2011; ...
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