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H-Lys(Boc)-HMPB NovaPEG resin

公司名称: Merck
产品编号: 856177
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Other protocol()

Determination of Flavin Potential in Proteins by Xanthine/Xanthine Oxidase Method
Author:
Date:
2020-04-05
[Abstract]  This protocol describes a simple xanthine/xanthine oxidase enzymatic equilibration method for determination of the redox potential of a flavin. As an example of the use of this method, we determine the reduction potential of the covalently bound FAD cofactor (Em = -55 mV) in the SdhA flavoprotein subunit of succinate dehydrogenase from Escherichia coli. In principle, this method can be used routinely to determine the redox potential of flavin cofactors in any simple flavoprotein from equilibrium concentrations with an appropriate reference dye of known Em ... [摘要]  [摘要] 该协议描述了一种简单的黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶酶平衡方法,用于测定黄素的氧化还原电位。作为使用此方法的一个例子,我们确定了大肠杆菌中琥珀酸脱氢酶的SdhA 黄素亚基中共价结合的FAD辅因子的还原电位(E m = -55 mV)。原则上,该方法可常规用于通过平衡浓度和已知E m 的适当参考染料确定任何简单黄素蛋白中黄素辅因子的氧化还原电位。 无需使用复杂的电化学设备。


[背景] 几种生物物理方法可用于测量蛋白质中黄素的还原中点电位(E m )。这些电位测量方法通常依赖于目标蛋白质和电极之间的电化学偶联。例如,在带有其他辅助因子(例如铁硫中心和醌)的复杂黄素蛋白中,常常使用电化学方法和电子顺磁共振(EPR)光谱来确定氧化还原中心的E m (Kowal 等,1995;Saenger等,等人,2005; Hudson 等人,2005; Cheng 等人,2015)。然而,在只包含黄素氧化还原中心简单黄素蛋白,辅助因子,可以直接通过它不需要特殊的设备电化学或昂贵的EPR仪表传统光学分光光度法研究。1990年,文森特·梅西(Vincent Massey)提出了一种简单的方法,该方法可以从氧化和还原伴侣(即黄素蛋白和参考染料)的平衡浓度中确定黄素的还原电位(Massey,1991)。该方法不直接测量黄素的还原电势,而是确定黄素和参考染料的E m ...

Measurement of Intracellular ROS in Caenorhabditis elegans Using 2’,7’-Dichlorodihydrofluorescein Diacetate
Author:
Date:
2018-03-20
[Abstract]   Reactive oxygen species (ROS) are generated during normal metabolic processes under aerobic conditions. Since ROS production initiates harmful radical chain reactions on cellular macromolecules, including lipid peroxidation, DNA mutation, and protein denaturation, it has been implicated in a wide spectrum of diseases such as cancer, cardiovascular disease, ischemia-reperfusion and aging. Over the past several decades, antioxidants have received explosive attention regarding their protective potential against these deleterious reactions. Accordingly, many analytical methodologies have been ... [摘要]  在有氧条件下的正常代谢过程中产生活性氧物质(ROS)。 由于ROS产生会引起细胞大分子的有害自由基连锁反应,包括脂质过氧化反应,DNA突变和蛋白质变性,因此它已涉及多种疾病,如癌症,心血管疾病,缺血再灌注和衰老。 在过去的几十年中,抗氧化剂已经受到爆炸性的关注,因为它们对这些有害反应具有保护作用。 因此,已经开发了许多分析方法用于评估化合物或复杂生物样品的抗氧化能力。 在此,我们介绍了使用2',7'-二氯荧光素二乙酸盐(H 2),在线虫体内用光度计检测体内细胞内ROS水平的简单方便的方法。 DCFDA),一种细胞渗透性示踪剂。

【背景】已经广泛地使用荧光探针2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(H 2 DCFDA)原位检测活体内细胞内活性氧簇(ROS)水平由在氧化应激和相关疾病领域工作的研究人员提供。非极性和非离子型探针H 2 DCFDA可以容易地穿透细胞膜并且被酯酶酶促脱乙酰化。该生物化学反应将H 2 DCFDA转化成非荧光化合物H 2 DCF,然后将其迅速氧化成高度荧光的2',7'-二氯荧光素(DCF) ROS的存在(图1A)。因此,来自H 2 ...

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