| Live-cell Imaging by Super-resolution Confocal Live Imaging Microscopy (SCLIM): Simultaneous Three-color and Four-dimensional Live Cell Imaging with High Space and Time Resolution
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Author:
Date:
2020-09-05
[Abstract] Many questions in cell biology can be solved by state-of-the-art technology of live cell imaging. One good example is the mechanism of membrane traffic, in which small membrane carriers are rapidly moving around in the cytoplasm to deliver cargo proteins between organelles. For directly visualizing the events in membrane trafficking system, researchers have long awaited the technology that enables simultaneous multi-color and four-dimensional observation at high space and time resolution. Super-resolution microscopy methods, for example STED, PALM/STORM, and SIM, provide greater spatial ...
[摘要]
[摘要 ] 活细胞成像的最新技术可以解决细胞生物学中的许多问题。一个很好的例子是膜流量的机制，我n的小的膜载流子迅速在细胞质中四处移动到细胞器之间递送货物蛋白。为了直接可视化膜运输系统中的事件，研究人员期待已久的技术可以在高空间和时间分辨率下同时进行多色和多维观察。超分辨率显微镜方法（例如STED，PALM / STORM和SIM）提供了更高的空间分辨率，但是，这些方法在时间分辨率上还不够。 我们开发的超高分辨率共聚焦实时成像显微镜（SCLIM）现在已达到所需的性能。通过使用SCLIM，我们对分泌货物以及标记有三种不同荧光蛋白的早期和晚期高尔基体驻留蛋白进行了高时空可视化。我们已经证明，分泌的货物确实是通过胸骨成熟而在高尔基体内递送的。此外，我们已经可视化了高尔基地区分泌性货物运输的详细信息，包括在成熟的水箱内形成区域，隔离了高尔基驻留的蛋白质，以及这些区域之间的货物运输。该协议可用于以高时空分辨率同时进行从酵母到高等植物和动物的活细胞中各种现象的三色和四维观察。
[背景 ] 的通过状态的最先进的光学显微镜活细胞成像发展极大地促进了残留在细胞生物学地址许多问题。例如，要可视化分泌途径中的事件，其中小的膜载体在细胞质中快速移动，则需要高速和三维（3D）图像采集。小号UPER分辨率共聚焦实时成像显微镜（SCLIM），我们开发（黑川等，2013） ...
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| Measuring Spatiotemporal Dynamics of Odor Gradient for Small Animals by Gas Chromatography
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Author:
Date:
2018-04-05
[Abstract] Odor is the most fundamental chemical stimulus that delivers information regarding food, mating partners, enemies, and danger in the surrounding environment. Research on odor response in animals is widespread, although studies on experimental systems in which the gradient of odor concentration is quantitatively measured has been quite limited. Here, we describe a method for measuring a gradient of odor concentration established by volatilization and diffusion in a relatively small enclosed space, which has been used widely in laboratories to analyze small model animals such as the nematode Caenorhabditis ...
[摘要] 气味是提供关于食物，交配伙伴，敌人和周围环境危险的信息的最基本的化学刺激物。关于动物气味反应的研究很普遍，尽管对定量测量气味浓度梯度的实验系统的研究非常有限。在这里，我们描述了一种测量由相对较小的封闭空间中的挥发和扩散建立的气味浓度梯度的方法，其已经在实验室中被广泛用于分析线虫等线虫和果蝇<果蝇黑腹果蝇。我们首先将已知量的液体加味剂2-壬酮蒸发到罐中并进行气相色谱分析以获得校准曲线。然后，我们从琼脂平板上的小孔中吸取少量气相并测量臭味浓度。通过在不同的空间和时间点重复这一点，我们能够检测随时间增加的气味浓度梯度。此外，通过将这些测量值应用于挥发和扩散的数学模型，我们能够可视化在琼脂平板上的气味浓度的估计动态变化。将琼脂平板中的气味浓度变化监测与通过机器视觉进行的行为监测相结合，将使我们能够估计大脑如何计算有关气味浓度变化的信息以调节行为。
【背景】气味是表达食物，生殖伙伴，敌人等在周围环境中存在的最基本的化学刺激物。小型模型动物，如线虫<秀秀隐杆线虫>和果蝇 适合理解大脑对行为，神经活动和分子水平的气味刺激的反应，因为：（1）利用便宜的高分辨率相机可以容易地记录对气味刺激的行为反应; （2）可以用钙成像测量多个神经元/神经元组中的反应，并且（3）负责行为和神经反应的基因可以用各种遗传方法鉴定（De Bono和Maricq，2005; ...
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