| In vivo and in vitro 31P-NMR Study of the Phosphate Transport and Polyphosphate Metabolism in Hebeloma cylindrosporum in Response to Plant Roots Signals
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Author:
Date:
2018-08-20
[Abstract] We used in vivo and in vitro phosphorus-31 nuclear magnetic resonance (31P-NMR) spectroscopy to follow the change in transport, compartmentation and metabolism of phosphate in the ectomycorrhizal fungus Hebeloma cylindrosporum in response to root signals originating from host (Pinus pinaster) or non-host (Zea mays) plants. A device was developed for the in vivo studies allowing the circulation of a continuously oxygenated mineral solution in an NMR tube containing the mycelia. The in vitro studies were performed on ...
[摘要] 我们使用体内和体外磷-31核磁共振（ 31 P-NMR）光谱来跟踪运输，分区和 外生菌根真菌 Hebeloma cylindrosporum 中的磷酸盐代谢响应来自宿主（ Pinus pinaster ）或非宿主（ Zea mays ）的根信号植物。 开发了一种用于体内研究的装置，其允许连续氧化的矿物质溶液在含有菌丝体的NMR管中循环。 在几个连续的处理步骤（在液氮中冷冻;用高氯酸压碎;消除高氯酸;冷冻干燥;在适当的液体培养基中溶解）后，对真菌材料进行体外研究。
【背景】 菌根真菌和植物之间的关联改善了宿主植物的P营养（Smith和Read，2008; Plassard和Dell，2010; Cairney，2011; Smith 等人，，2015）。这种积极效应主要归因于真菌菌丝对磷酸盐（Pi）的吸收，探测了在活跃吸收根周围的耗竭区以外的大量土壤（Smith和Read，2008; Cairney，2011; Smith et al。< em="">，2015）和真菌细胞分泌细胞外磷酸酶（Quiquampoix和Mousain，2005）。吸收的Pi部分地掺入磷酸化的代谢物，磷脂和核酸中，并且部分地浓缩成多磷酸盐（PolyP），其中它们构成液泡中的储存池（Ashford 等人，，1994）。该协议详述了一种装置，该装置允许通过 31 ...
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| Evaluation of Root pH Change Through Gel Containing pH-sensitive Indicator Bromocresol Purple
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Author:
Date:
2018-04-05
[Abstract] The Rapid Alkalinization Factor (RALF) is a plant hormone peptide that inhibits proton transport causing alkalinization of the extracellular media. To detect the alkalinization response elicited by RALF peptides in root cells, Arabidopsis seedlings are carefully transferred to a gel containing the pH-sensitive indicator bromocresol purple, treated with the peptide and photographed after 30 min. Herein the protocol is optimized for evaluation of exogenous treatment, described in detail and expected results are presented.
[摘要] 快速碱化因子（RALF）是一种植物激素肽，可抑制质子转运，导致细胞外培养基碱化。 为了检测由根细胞中的RALF肽引发的碱化反应，将拟南芥幼苗仔细转移至含有pH敏感指示剂溴甲酚紫紫的凝胶中，用肽处理并在30分钟后拍照。 在此，该方案针对外源性治疗的评估进行了优化，详细描述并呈现预期结果。
【背景】质子运输是由无数的信号引起的，并被植物用来协调增长，防御和发展。一些植物激素肽可以影响质子转运，引起细胞外基质强碱性化（Felix和Boller，1995; Pearce等人，2001a）。 5kDa肽激素快速碱化因子（RALF）在分泌后与其受体FERONIA结合，并导致质膜H + - 腺苷三磷酸酶2的磷酸化，抑制质子转运并碱化细胞外培养基（Pearce等人，2001b; Haruta等人，2014）。
含有pH指示剂溴甲酚紫的生长培养基是在根周围的培养基中观察碱化或酸化的有效方法。先前已经使用该方法来表明NaRALF是调节根毛细胞外pH所需的（Wu等人，2007），并且过表达AtRALF23的植物的根具有降低的将根际酸化的能力（Srivastava ，2009）。 Masachis等人也使用pH指示剂溴甲酚紫紫色的生长培养基。 （2016）证明由真菌病原体产生的RALF同源物诱导了番茄植物根周围的培养基的碱化。
我们已经优化了pH指示剂溴甲酚紫方案，并且使用改进的方案，我们能够在AtRALF1处理后在野生型和突变体幼苗中观察到拟南芥根部周围的碱化作用（Dressano等人， ...
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