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Date:
2018-04-05
[Abstract] The Rapid Alkalinization Factor (RALF) is a plant hormone peptide that inhibits proton transport causing alkalinization of the extracellular media. To detect the alkalinization response elicited by RALF peptides in root cells, Arabidopsis seedlings are carefully transferred to a gel containing the pH-sensitive indicator bromocresol purple, treated with the peptide and photographed after 30 min. Herein the protocol is optimized for evaluation of exogenous treatment, described in detail and expected results are presented.
[摘要] 快速碱化因子（RALF）是一种植物激素肽，可抑制质子转运，导致细胞外培养基碱化。 为了检测由根细胞中的RALF肽引发的碱化反应，将拟南芥幼苗仔细转移至含有pH敏感指示剂溴甲酚紫紫的凝胶中，用肽处理并在30分钟后拍照。 在此，该方案针对外源性治疗的评估进行了优化，详细描述并呈现预期结果。
【背景】质子运输是由无数的信号引起的，并被植物用来协调增长，防御和发展。一些植物激素肽可以影响质子转运，引起细胞外基质强碱性化（Felix和Boller，1995; Pearce等人，2001a）。 5kDa肽激素快速碱化因子（RALF）在分泌后与其受体FERONIA结合，并导致质膜H + - 腺苷三磷酸酶2的磷酸化，抑制质子转运并碱化细胞外培养基（Pearce等人，2001b; Haruta等人，2014）。
含有pH指示剂溴甲酚紫的生长培养基是在根周围的培养基中观察碱化或酸化的有效方法。先前已经使用该方法来表明NaRALF是调节根毛细胞外pH所需的（Wu等人，2007），并且过表达AtRALF23的植物的根具有降低的将根际酸化的能力（Srivastava ，2009）。 Masachis等人也使用pH指示剂溴甲酚紫紫色的生长培养基。 （2016）证明由真菌病原体产生的RALF同源物诱导了番茄植物根周围的培养基的碱化。
我们已经优化了pH指示剂溴甲酚紫方案，并且使用改进的方案，我们能够在AtRALF1处理后在野生型和突变体幼苗中观察到拟南芥根部周围的碱化作用（Dressano等人， ...
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