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Multi-Mode Microplate Reader

公司名称: BioTek Instruments
产品编号: BioTekTM SynergyTM 2
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Purification of Total RNA from DSS-treated Murine Tissue via Lithium Chloride Precipitation
Author:
Date:
2018-05-05
[Abstract]  We have developed a protocol to purify RNA from DSS (Dextran Sulfate Sodium)-treated mouse tissues. This method, which prevents downstream inhibition of q-RT-PCR observed in DSS-treated tissues, relies on successive precipitations with lithium chloride. [摘要]  我们开发了一种从DSS(葡聚糖硫酸钠)处理的小鼠组织中纯化RNA的方案。 这种防止DSS处理组织中观察到的q-RT-PCR下游抑制的方法依赖于氯化锂的连续沉淀。

【背景】葡聚糖硫酸钠(DSS)在实验室中非常普遍地用于诱导啮齿动物的结肠炎。具体而言,它模拟人类炎性肠病(IBD)与溃疡性结肠炎(UC)特征的临床和组织学特征。 DSS在饮用水中稀释并穿透组织。我们已经观察到用DSS污染RNA提取物阻止了从结肠和小肠成功的后续扩增过程,但也阻止了从DSS处理的动物获得的血液和其他组织。之前我们已经证明,样品中DSS的存在抑制了逆转录和聚合酶链式反应扩增(Viennois等人,2013)。 Kerr等人以剂量依赖的方式观察到这种抑制作用,他们提出了基于多聚-A纯化的技术以从总RNA提取物中去除DSS(Kerr等人,,2012)。我们在此提出了另一种有效和经济的方法,用于基于氯化锂(LiCl)沉淀纯化来自DSS迹线的总RNA提取物。这种方法已经在我们的实验室以及其他方面得到了广泛的应用(Chassaing et al。,2012,Li et al。,2016)。但是,没有尝试详细记录该程序。因此,我们详细描述了用另一种方法(Trizol,Spin柱为基础的核酸纯化)从主要从DSS处理的鼠组织中分离的总RNA的LiCl纯化步骤。

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