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Potassium dihydrogen phosphate

公司名称: Merck
产品编号: 1048731000
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Induction of Epithelial-mesenchymal Transition in MDCK II Cells
Author:
Date:
2021-02-05
[Abstract]  

Epithelial-mesenchymal transition (EMT) is a reversible process of epithelial cell transdifferentiation into a mesenchymal cell, that enables initiation of cell migration. EMT plays an important role in embryonic development, tissue repair and cancer metastasis. Better understanding of cellular and molecular events during EMT will not only provide novel insights on how mammalian organism develops and how epithelial tissues regenerate, but also can identify novel therapeutic targets for cancer therapy. Here we aim to provide a detailed protocol on how to induce EMT in Madin-Darby Canine Kidney

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[摘要]  [摘要]上皮-间质转化(EMT)是上皮细胞向分化为间充质细胞的可逆过程,能够启动细胞迁移。EMT在胚胎发育,组织修复和癌症转移中起着重要作用。更好地了解EMT过程中的细胞和分子事件,不仅将为哺乳动物生物的发育以及上皮组织的再生提供新颖的见解,而且还可为癌症治疗确定新的治疗靶标。在这里,我们旨在提供有关如何在Madin-Darby犬肾脏(MDCK)II上皮细胞系中诱导EMT并在EMT诱导的细胞上进行免疫荧光染色的详细协议。


[背景]上皮细胞的特征在于细胞可塑性,即具有采用不同细胞表型的能力(Carter等,2019; Yuan等,2019)。上皮-间质转化(EMT)是上皮细胞可塑性的一种形式。在EMT期间,上皮细胞会破坏细胞间连接,使其极性失去作用,并从鳞状,长方体或柱状变为梭形并迁移,从而获得间充质细胞的特性(Kalluri和Weinberg,2009)。EMT可以通过免疫染色和测量标志物(例如E-钙粘蛋白,ZO-1,波形蛋白,纤连蛋白和N-钙粘蛋白)的表达水平进行评估(Kalluri和Weinberg,2009)。在过去十年中在EMT研究中心大多的转录因子的作用例如,SNAIL1 / 2,ZEB1 / ...

Characterizing the Transcriptional Effects of Endolysin Treatment on Established Biofilms of Staphylococcus aureus
Author:
Date:
2018-06-20
[Abstract]  Biofilms are the most common lifestyle of bacteria in both natural and human environments. The organized structure of these multicellular communities generally protects bacterial cells from external challenges, thereby enhancing their ability to survive treatment with antibiotics or disinfectants. For this reason, the search for new antibiofilm strategies is an active field of study. In this context, bacteriophages (viruses that infect bacteria) and their derived proteins have been proposed as promising alternatives for eliminating biofilms. For instance, endolysins can degrade peptidoglycan ... [摘要]  生物膜是自然和人类环境中最常见的细菌生活方式。这些多细胞社区的有组织结构通常保护细菌细胞免受外部挑战,从而增强其抗生素或消毒剂治疗的生存能力。为此,寻找新的抗菌膜策略是一个积极的研究领域。在这种情况下,已提出噬菌体(感染细菌的病毒)及其衍生蛋白作为消除生物膜的有希望的替代物。例如,内溶素可降解肽聚糖,并最终裂解靶细菌细胞。然而,表征暴露于这些化合物的细菌细胞的反应以改进基于噬菌体的抗微生物策略的设计是重要的。

如以前在Fernández等人(2017)中所描述的,开发该协议以检查暴露于内溶素处理的金黄色葡萄球菌生物膜细胞的转录反应。然而,它可能随后适用于分析其他微生物对不同抗菌剂的反应。

【背景】越来越清楚的是,亚抑制剂量的抗菌剂可能对目标微生物的不同表型具有调节作用,包括生物膜形成,代谢或毒力。因此,研究新化合物对低浓度靶细胞的潜在影响应该是发展过程的一部分。事实上,引发毒力因子或抗生素耐药决定簇产生的非常有效的抗菌剂可能不是治疗应用的良好候选者。另一方面,考虑到生物膜和浮游细胞之间的生理差异,应该对生物膜形成细胞分析新抗生物膜剂的作用似乎是合乎逻辑的。在这里,我们描述了一种协议,用于分析生物膜细胞在亚抑制浓度的内抑素浓度下的转录反应,噬菌体来源的蛋白质作为生物膜去除剂展现出巨大的前景。因此,通过RNA-seq将内溶素处理的细胞的转录组与对照细胞进行比较,并且后来通过RT-qPCR证实了所选基因的差异表达。 ...

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