| Induction and Quantification of Patulin Production in Penicillium Species
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Author:
Date:
2017-06-05
[Abstract] Patulin, a worldwide regulated mycotoxin, is primarily produced by Penicillium and Aspergillus species during fruit spoilage. Patulin contamination is a great concern with regard to human health because exposure of the mycotoxin can result in severe acute and chronic toxicity, including neurotoxic, mutagenic, and immunotoxic effects. Penicillium expansum is known as the main producer of patulin. This protocol addresses the cultivation procedure of P. expansum under patulin permissive conditions and describes the method of collection and detection of patulin.
[摘要] Patulin是世界范围内调节的真菌毒素，主要是在水果腐败期间由青霉菌和曲霉菌种生产的。蛋白污染是人类健康的重大问题，因为霉菌毒素的暴露会导致严重的急性和慢性毒性，包括神经毒性，诱变性和免疫毒性作用。青霉素被称为patulin的主要生产者。该协议涉及到P的培育程序。膨化条件下的膨胀，并描述了patulin的收集和检测方法。
背景 丙氨酸是一种聚酮内酯霉菌毒素，是由几种真菌，包括青霉菌，曲霉菌和其他物种产生的。其中，广西青霉菌是一种着名的收获后病原体，在贮存期间引起了果皮果实的腐烂，是主要的生产者。由于毒素引起的严重急性和慢性作用，苹果产品中的蛋白酶水平受到极大的关注。因此，世界上许多国家的食品中的蛋白质水平有限。欧盟委员会（2006年）确定了苹果汁（50μg/ kg），固体苹果产品（25μg/ kg），最重要的是果实婴儿食品（10μg/ kg）的最高允许水平，因为儿童苹果衍生产品的主要消费者。
＆NBSP;近年来对青霉素的研究主要集中在调节蛋白质生产的环境因素，patulin生物合成的分子基础和patulin的生物降解。在这些研究中，嘌呤产生的诱导和定量的方法是重要的。水果中的蛋白质分析通常遵循AOAC方法995.10（Brause等人，1996）。用果胶酶处理后，用醋酸乙酯从果实的腐烂部分提取白蛋白。已经开发了许多用于测量patulin的方法，例如TLC，质谱和气相色谱/质谱。现在，使用紫外光检测（HPLC-UV）的高效液相色谱法是最常用的方法（Baert等人，2007）。 ...
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| Expression and Purification of Cyanobacterial Circadian Clock Protein KaiC and Determination of Its Auto-phosphatase Activity
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Author:
Date:
2017-02-20
[Abstract] Circadian rhythms are biological processes displaying an endogenous oscillation with a period of ~24 h. They allow organisms to anticipate and get prepared for the environmental changes caused mainly by the rotation of Earth. Circadian rhythms are driven by circadian clocks that consist of proteins, DNA, and/or RNA. Circadian clocks of cyanobacteria are the simplest and one of the best studied models. They contain the three clock proteins KaiA, KaiB, and KaiC which can be used for in vitro reconstitution experiments and determination of the auto-phosphatase activity of KaiC as ...
[摘要] 昼夜节律是显示内源性振荡的生物过程，周期为〜24小时。它们允许生物体预期并准备好主要由地球旋转引起的环境变化。昼夜节律由由蛋白质，DNA和/或RNA组成的昼夜节律钟驱动。蓝藻的昼夜节律时钟是最简单的研究模型之一。它们含有三种时钟蛋白质KaiA，KaiB和KaiC，其可用于体外重组实验和本方案所述的KaiC的自磷酸酶活性的测定。
背景 行星地球的旋转导致〜24小时的昼夜振荡。为了适应并有效地利用环境的这种节奏变化，大多数（如果不是全部）生物体具有约24小时的内源性活动节律，这被称为昼夜节律。昼夜节律为这些生物提供进化优势。昼夜节律的长期破坏是非常有害的（Ma et al。，2013）。在人类中，包括癌症，高血压和睡眠障碍在内的许多疾病与昼夜节律紊乱密切相关（Shi等人，2013; Roenneberg和Merrow，2016）。
＆nbsp;昼夜节律由称为昼夜节律钟的内生节律发生器控制。功能性昼夜节律钟具有三个功能：接受环境信息，将环境提示转变为振荡信号，并将这些信号转发到下游调制器（Pattanayak和Rust，2014）。蓝细菌是具有良好研究的昼夜节律钟的最简单的生物体，其中振荡发生器由三种蛋白质控制：KaiA，KaiB和KaiC（Mackey等人，2011; Johnson＆amp; et al。 ...
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| Expression and Purification of the GRAS Domain of Os-SCL7 from Rice for Structural Studies
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Author:
Date:
2017-02-05
[Abstract] GRAS proteins, named after the first three members GAI, RGA and SRC, has been found in 294 embryophyta species and is represented by 1,035 sequences. They belong to a plant-specific protein family and play essential roles in plant growth and development. Proteins in this family are defined as minimally containing a conserved GRAS domain, which is about 350-450 resides and can be subdivided into five distinct motifs with their name derived from the most prominent amino acids: LRI (leucine-rich region I), VHIID, LRII (leucine-rich region II), PFYRE and SAW and mainly function in the interaction ...
[摘要] 以前3个成员GAI，RGA和SRC命名的GRAS蛋白质已被发现在294个胚胎种，并由1,035个序列表示。它们属于植物特异性蛋白质家族，在植物生长和发育中起重要作用。该家族中的蛋白质被定义为最低限度地含有保守的GRAS结构域，其约为350-450个，并且可以细分为五个不同的基序，其名称源自最突出的氨基酸：LRI（富含亮氨酸的区域I），VHIID ，LRII（富含亮氨酸的区域II），PFYRE和SAW，并且主要在GRAS蛋白质与其配偶体之间的相互作用中起作用（Sun等人，2012）。通过系统发育分析，GRAS家族可以分为十多个亚科，其中SCL4 / 7是一个重要的亚组，对应对环境压力有作用。这里我们描述了Os-SCL7（水稻SCL4 / 7成员）的GRAS结构域的表达和纯化的详细方案，使我们能够使其结晶并确定其结构。
背景 GRAS蛋白是一个大家族，在植物发育和信号转导中起重要作用。结果表明，一些家庭成员如DELLAs起到GA响应植物生长的抑制作用，是GA信号通路（Murase等人，2008）中的关键调控目标，NSP1和NSP2起重要作用在调节结瘤发育和信号传导（Kaló等人，2005）中，蛋白质SCR和SHR一起在控制根和芽的径向图案中起重要作用（Helariutta et ...
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