| Production of Phenotypically Uniform Human Cerebral Organoids from Pluripotent Stem Cells
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Author:
Date:
2021-04-20
[Abstract] Recent advances in stem cell technology have allowed researchers to generate 3D cerebral organoids (COs) from human pluripotent stem cells (hPSCs). Indeed, COs have provided an unprecedented opportunity to model the developing human brain in a 3D context, and in turn, are suitable for addressing complex neurological questions by leveraging advancements in genetic engineering, high resolution microscopy, and tissue transcriptomics. However, the use of this model is limited by substantial variations in the overall morphology and cellular composition of organoids derived from the same ...
[摘要] [摘要]在干细胞技术的最新进展已经使研究人员能够产生3D脑类器官由人多能干细胞（（COS）hPSCs ）。事实上，COS提供了一个前所未有的机会，发展人的大脑在3D场景模型，并反过来，适用于通过利用在进步，基因工程，高分辨率显微镜处理复杂的神经系统的问题，并组织转录。然而，在U SE 该模型的模型受到源自同一多能细胞系的类器官的整体形态和细胞组成的实质性变化的限制。为了解决这些限制，我们建立了坚固的，高-通过优化的初始阶段用于生产相一致的COS效率协议胚状体（EB）形成和神经诱导。使用该协议，采购员可以重复地与产生一个均匀的尺寸，形状，以及跨多个批次的细胞组合物。˚F urthermore，类器官的是发展了延长的时间段（3 - 6个月）显示建立的相对成熟的功能，包括电生理学活性的神经元，少突胶质细胞和祖细胞的产生。因此，该平台提供了可用于研究人脑发育和相关疾病的强大实验模型。
图形摘要：
多能干细胞对脑类器官发育的概述
[背景技术]在最新进展在体外从人多能干细胞（衍生3D脑类器官（COS）的发展hPSCs ...
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| Generation of Human iPSC-derived Neural Progenitor Cells (NPCs) as Drug Discovery Model for Neurological and Mitochondrial Disorders
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Author:
Date:
2021-03-05
[Abstract] The high attrition rate in drug development processes calls for additional human-based model systems. However, in the context of brain disorders, sampling live neuronal cells for compound testing is not applicable. The use of human induced pluripotent stem cells (iPSCs) has revolutionized the field of neuronal disease modeling and drug discovery. Thanks to the development of iPSC-based neuronal differentiation protocols, including tridimensional cerebral organoids, it is now possible to molecularly dissect human neuronal development and human brain disease pathogenesis in a dish. These ...
[摘要] [摘要]药物开发过程中的高流失率要求使用其他基于人的模型系统。但是，在脑部疾病的情况下，不适合对活的神经元细胞进行采样以进行化合物测试。人类诱导的多能干细胞（iPSC ）的使用彻底改变了神经元疾病建模和药物发现领域。由于基于iPSC的神经元分化方案（包括三维脑类器官）的发展，现在可以在一个碟子中分子解剖人神经元发育和人脑疾病的发病机理。这些方法可以允许在与疾病相关的细胞环境中解剖患者特异性的治疗功效。但是，对于药物发现方法，需要高度可复制且具有成本效益的细胞模型。在这里，我们描述了一种一步-步骤，用于从人产生健壮和可膨胀的神经祖细胞（NPC）工艺的iPSC 。用此协议生成的NPC是同质的且高度增殖。这些功能使NPC适合开发用于药物发现的高通量化合物筛选。人iPSC衍生的NPC示出了代谢依赖于线粒体活性，因此可也用于研究神经病症，其中线粒体功能受到影响。该协议涵盖了制备，培养和表征人iPSC来源的NPC所需的所有步骤。
图形摘要：
示意性的协议的所述发电机密封的离子人类源自iPSC的的NPC
[背景技术]近年来，目标为中心的药物发现的缺点已经用于寻址的神经系统疾病的方案变得明显，特别是（保罗等人，2010） ...
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| Implantation of Human Peripheral Corneal Spheres into Cadaveric Human Corneal Tissue
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Author:
Date:
2017-07-20
[Abstract] Stem and progenitor cells isolated from human limbal tissue can be cultured in vitro as spheres. These spheres have potential for use as transplantable elements for the repopulation of corneal tissue (Mathan et al., 2016). Herein we describe the detailed protocol for the implantation of human corneal spheres into cadaveric human corneal tissue. This protocol describes the procedure for sphere formation and culture, preparation of tissue for sphere implantation, corneal limbus microsurgery and sphere implantation.
[摘要] 可以将从人角膜缘组织分离的茎细胞和祖细胞作为球体体外培养。 这些球体有可能用作角膜组织再造的可移植元件（Mathan等人，2016）。 这里我们描述了将人角膜球植入尸体人角膜组织的详细方案。 该协议描述了球形成和培养的过程，球体植入组织的制备，角膜缘显微外科手术和球体植入。
【背景】以前的研究集中在隔离角膜缘细胞，这些细胞完全是上皮细胞（角膜缘干细胞）或基质（角质细胞祖细胞），以破译他们在角膜内稳态和伤口修复中的各自角色。 该方案旨在通过其在培养物中形成球体的功能能力来分离角膜缘细胞，并且其本质将包括上皮和间质的多种细胞，其有助于角膜缘的形成。 在分离这些球体之后，我们正在调查其在植入后角膜修复中的潜在用途。 在这里，我们描述了一种用于将这些球体植入人角膜组织和下游分析的体外手术方案。
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