| In vitro Cultivation and Visualization of Malaria Liver Stages in Primary Simian Hepatocytes
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Author:
Date:
2020-08-20
[Abstract] Human liver is the primary and obligatory site for malaria infection where sporozoites invade host hepatocytes. Malaria hepatic stages are asymptomatic and represent an attractive target for development of anti-malarial interventions and vaccines. However, owing to lack of robust and reproducible in vitro culture system, it is difficult to target and study this imperative malaria liver stage. Here, we describe a procedure that allow cultivation and visualization of malaria hepatic stages including dormant hypnozoites using primary simian hepatocytes. This method enables sensitive and ...
[摘要] [摘要 ] 人肝是疟疾感染的主要场所，子孢子侵入宿主肝细胞。疟疾的肝分期是无症状的，并且是开发抗疟疾干预措施和疫苗的有吸引力的目标。然而，由于缺乏健壮和可重现的体外培养系统，因此难以靶向和研究这种必不可少的疟疾肝阶段。在这里，我们描述了一种程序，该程序允许使用原代猿猴肝细胞培养和可视化疟疾肝阶段，包括休眠的次生子。这种方法可以对体外不同肝期进行灵敏和定量的评价。
[背景 ] 疟疾是女性的叮咬后传染给人类按蚊蚊子注入子孢子进入血流，其迁移到肝脏和侵入宿主的肝细胞。在肝细胞内部，子孢子进行第一轮无性繁殖并转化为多核肝裂殖体。完全成熟的肝脏裂殖体破裂并释放裂殖子，该裂殖子进入血流并感染红细胞（RBC）。在红细胞内部，寄生虫进行了第二轮无性繁殖，血液阶段的完成最终引起了与疟疾有关的临床症状。例外地，在所有疟原虫物种中，间日疟原虫，食蟹猴和卵圆形疟原虫的子孢子可产生休眠的肝形式，称为次生子孢子（Prudêncioet al。，2011）。
间日疟原虫是第二大主要疟原虫，在包括热带，亚热带和温带气候在内的所有疟疾物种中地理分布更广。消除间日疟原虫疟疾的最大挑战是由休眠的次生子激活引起的周期性疟疾复发，这些休眠的次生子启动了肝阶段增殖的发作（Wells ...
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| Intestinal Enteroid Culture for Human Astroviruses
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Author:
Date:
2020-07-20
[Abstract] Human astroviruses (HAstV) are non-enveloped, positive-sense single stranded RNA viruses that typically cause gastroenteritis in children, the elderly and among immunocompromised individuals. Some HAstV species have also been implicated in neurological diseases. It is important to study these viruses to understand the pathogenesis and develop therapeutics. Here we describe HAstV infection in epithelium-only human intestinal enteroids (HIE) isolated from biopsy-derived intestinal crypts. Although different HAstV clades have been propagated in transformed immortalized cell lines such as A549, ...
[摘要] [摘要] 人类星状病毒（HAstV）是一种非包膜，正向单链RNA病毒，通常会导致儿童，老年人和免疫力低下的人群中的肠胃炎。一些HAstV物种也与神经系统疾病有关。研究这些病毒以了解其发病机理并开发治疗方法非常重要。在这里我们描述HAstV感染 从活检来源的肠隐窝中分离出的仅上皮的人肠小肠类固醇（HIE）。尽管已经在转化的永生化细胞系（例如A549，Caco-2，HEK293T和Huh7.5）中繁殖了不同的HAstV进化枝，但我们选择HIE是因为它们可以更好地模仿人的肠道，因此在生理上更相关。此外，HIE支持所有HAstV进化枝的复制，包括临床样品，因此使HIE成为研究HAstV生物学的有价值的潜在通用模型。
[背景] 人类星状病毒（HAstV）是高度流行的肠病毒，会引起从腹泻到脑炎的广泛感染。无症状，全身和肠道外感染很常见（Madeley和Cosgrove 1975；Bosch 等人，2014；Kolawole 等人，2019）。尽管具有医学重要性，但H AstV 是一些特征最弱的肠病毒。目前，已识别出三组人类AstV：经典HAstV和非经典HAstV-MLB（墨尔本），以及HAstV-VA / ...
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| Image-Based Analysis of Mitochondrial Area and Counting from Adult Mouse Dopaminergic Neurites
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Author:
Date:
2018-08-20
[Abstract] Mitochondria form dynamic cytoplasmic networks which undergo morphological changes in order to adapt to cellular stresses and signals. These changes can include alterations in size and number within a given cell. Analysis of the whole network can be a useful metric to assess overall mitochondrial health, particularly in neurons, which are highly sensitive to mitochondrial dysfunction. Here we describe a method which combines immunofluorescence and computerized image analysis to measure mitochondrial morphology (quantification of number, density, and area) in dopaminergic neurites of mice ...
[摘要] 线粒体形成动态细胞质网络，其经历形态变化以适应细胞应激和信号。 这些变化可以包括给定单元内的大小和数量的改变。 分析整个网络可以是评估整体线粒体健康的有用指标，特别是在对线粒体功能障碍高度敏感的神经元中。 在这里，我们描述了一种方法，它结合免疫荧光和计算机图像分析，以测量表达线粒体靶向eYFP的小鼠的多巴胺能神经突的线粒体形态（数量，密度和面积的量化）。
【背景】 线粒体是存在于每个复杂生物的基本上所有细胞中的双膜细胞器。它们的主要功能是提供大部分细胞能量作为ATP，但它们也在细胞凋亡，缓冲细胞内Ca 2 + ，活性氧物质产生和膜电位调节中发挥作用（Neupert和Herrmann， 2007; Hamanaka和Chandel，2010; Shutt和McBride，2013）。
这些细胞器通常被描述为单个“豆状”结构，实际上是动态细胞质网络的组成部分。它们可以经历由膜融合和裂变的动态过程调节的主要形态变化，该过程被认为涉及通过称为线粒体自噬的过程消除功能障碍的细胞器。线粒体网络也可以作为对高细胞能量需求的响应而增加（Sheng，2017; Devine和Kittler，2018）。线粒体网络的形态可以根据不同的应激源而改变，并且存在多种可能的形态，即细胞类型，甚至细胞室依赖性（Picard et al。，2013 ...
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