| Obtaining Multi-electrode Array Recordings from Human Induced Pluripotent Stem Cell–Derived Neurons
|
|
Author:
Date:
2017-11-20
[Abstract] Neuronal electrical properties are often aberrant in neurological disorders. Human induced pluripotent stem cells (hiPSCs)-derived neurons represent a useful platform for neurological disease modeling, drug discovery and toxicity screening in vitro. Multi-electrode array (MEA) systems offer a non-invasive and label-free platform to record neuronal evoked-responses concurrently from multiple electrodes. To better detect the neural network changes, we used the Axion Maestro MEA platform to assess neuronal activity and bursting behaviors in hiPSC-derived neuronal cultures. Here we ...
[摘要] 神经元电特性在神经疾病中经常是异常的。 人诱导的多能干细胞（hiPSC）衍生的神经元代表神经疾病建模，药物发现和体外毒性筛选的有用平台。 多电极阵列（MEA）系统提供了一个非侵入性的无标记平台，可同时记录来自多个电极的神经元诱发反应。 为了更好地检测神经网络变化，我们使用了Axion Maestro MEA平台来评估hiPSC衍生的神经元培养物中的神经元活动和爆裂行为。 在这里，我们描述了神经元培养准备，MEA记录和数据分析的详细方案，我们希望这将有益于该领域的其他研究人员。
【背景】人类诱导多能干细胞（hiPSC）技术目前正用于体外模拟神经和精神疾病。最近的研究已经证明，与特定疾病有关的某些细胞表型可以在盘中重现。神经电活动是神经系统功能的本质，代表了正常功能对于情绪，记忆，感觉形态和体内行为至关重要的交流的关键形式。在疾病状况下，电特性可能受到影响，因此了解基于hiPSC的神经疾病模型中的神经元电路连接性，生理学和病理学非常重要。
膜片钳和多电极阵列（MEA）技术是用于评估电生理学活性并由此评估神经元功能的主要技术。尽管膜片钳是研究单个细胞的活性和功能的强大的细胞内方法（Neher等人，1978），MEA平板具有记录细胞外动作电位（或尖峰）的能力，和同一板中数千个不同细胞同时的局部场电位，从而更好地理解网络水平的神经元活动（Hutzler等人，2006; ...
|
|
|
| Isolation and Primary Cell Culture of Mouse Dorsal Root Ganglion Neurons
|
|
Author:
Date:
2016-04-05
[Abstract] We here provide a detailed protocol for the isolation and culture of primary mouse sensory neurons. The cell bodies of sensory afferent pseudounipolar neurons are located in dorsal root ganglia (DRGs) along the vertebral column. Dissected mouse DRGs can be dissociated into single cells by enzymatic digestion to obtain primary cultures of mouse sensory neurons as performed in the studies reported by Khaminets et al. (2015).
[摘要] 我们在这里提供了详细的协议，用于隔离和培养的主要小鼠感觉神经元。 感觉传入假性极化神经元的细胞体位于沿着脊柱的背根神经节（DRG）中。 解离的小鼠DRG可以通过酶消化解离成单个细胞，以获得小鼠感觉神经元的原代培养物，如Khaminets等人（2015）报道的研究中所进行的。
|
|
|
| Visualization of Cell Complexity in the Filamentous Cyanobacterium Mastigocladus laminosus by Transmission Electron Microscopy (TEM)
|
|
Author:
Date:
2014-12-05
[Abstract] The cyanobacterium Mastigocladus laminosus (M. laminosus) is one of the most morphologically complex prokaryotes. It forms long chains of cells that are connected via septal junction complexes; such complexes allow diffusion of metabolites and regulators between neighboring cells. Cellular division occurs in multiple planes, resulting in the formation of true branches, and cell differentiation leads to the formation of specialized cell types for nitrogen fixation (heterocysts) and culture dispersal (hormogonia and necridia). Here, we describe a detailed protocol for the ...
[摘要] 蓝藻（Mastigocladus laminosus）（ M。laminosus ）是最具形态复杂的原核生物之一。 它形成通过间隔连接复合物连接的细胞的长链; 这种复合物允许代谢物和调节剂在相邻细胞之间扩散。 细胞分裂发生在多个平面，导致真正的分支的形成，细胞分化导致固氮（heterocysts）和文化扩散（hormogonia和necridia）的专门细胞类型的形成。 在这里，我们描述了用于制备 M的详细方案。 层状结构用于TEM，以便可视化生物体的超微结构特性。 所提出的制备方法基于添加高锰酸钾作为固定剂，已显示增加膜的对比度（Luft，1956），使其适合于在其中光合膜的可视化是重要的蓝细菌的研究。
|
|
|