| Calcium Imaging of Neuronal Activity under Gradually Changing Odor Stimulation in Caenorhabditis elegans
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Author:
Date:
2021-01-05
[Abstract] Olfactory behavior is among the most fundamental animal behaviors both in the wild and in the laboratory. To elucidate the neural mechanisms underlying olfactory behavior, it is critical to measure neural responses to odorant concentration changes resembling those that animals actually sense during olfactory behavior. However, reproducing the dynamically changing olfactory stimuli to an animal during such measurements of neural activity is technically challenging. Here, we describe technical details and protocols for odor stimulation during calcium imaging of the sensory neurons of the ...
[摘要] [摘要]嗅觉行为是在野外和实验室中最基本的动物行为之一。为了阐明嗅觉行为的神经机制，至关重要的是测量对气味浓度变化的神经反应，类似于动物在嗅觉行为期间实际感知到的变化。然而，在这种神经活动的测量过程中，将动态变化的嗅觉刺激再现给动物是技术上的挑战。在这里，我们描述线虫秀丽隐杆线虫的感觉神经元的钙成像过程中气味刺激的技术细节和协议。在这个系统中，秀丽隐杆线虫的神经元活性 在一段时间内暴露于定量控制的嗅觉刺激过程中，使用比例钙成像法测量钙。根据预先设计的时间气味梯度，可以精确控制动物周围气味浓度的时间变化，从而在行为舞台上的嗅觉行为过程中再现实际的气味浓度变化。通过监视响应于实际嗅觉刺激的神经活动，可以阐明嗅觉输入由神经活动处理并反映在行为输出中的机制。
[背景]嗅觉是一种重要的形态，几乎所有动物物种都使用嗅觉来进行生存和繁殖，并且对嗅觉行为（如信息素反应，先天/学习到的恐惧反应和嗅觉导航）进行了深入研究（Bargmann，2006； Jacobs，2012） ...
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| Liposome Flotation Assay for Studying Interactions Between Rubella Virus Particles and Lipid Membranes
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Author:
Date:
2018-08-20
[Abstract] Rubella virus (RuV) is an enveloped, positive-sense single-stranded RNA virus that is pathogenic to humans. RuV binds to the target cell via the viral envelope protein E1, but the specific receptor molecules on the target cell are yet to be fully elucidated. Here, we describe a protocol for liposome flotation assay to study direct interactions between RuV particles and lipid membranes in a qualitative manner. Interactions are examined by a Nycodenz density gradient fractionation using UV-inactivated RuV particles and fluorescent-labeled liposomes consisting of pure lipids. Fractionated RuV ...
[摘要] 风疹病毒（RuV）是一种包膜的正义单链RNA病毒，对人类具有致病性。 RuV通过病毒包膜蛋白E1与靶细胞结合，但靶细胞上的特异性受体分子尚未完全阐明。在这里，我们描述了脂质体浮选测定的方案，以定性方式研究RuV颗粒和脂质膜之间的直接相互作用。使用UV-灭活的RuV颗粒和由纯脂质组成的荧光标记的脂质体通过Nycodenz密度梯度分级检查相互作用。使用标准十二烷基硫酸钠 - 聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）检测分级的RuV颗粒，然后对病毒蛋白进行Western印迹分析。在Nycodenz梯度上，与未结合的RuV颗粒相比，与脂质体结合的RuV颗粒转移至较低密度的部分。使用该方案，我们提供了令人信服的证据，即在中性pH下以钙依赖性方式，RuV颗粒与某些细胞类型中含有鞘磷脂（SM）和胆固醇的脂质膜结合。
【背景】 风疹病毒是“风疹”的致病因子，“风疹”是一种急性且相对轻微的全身性感染和“先天性风疹综合征”，一种导致严重出生缺陷的转胎胎儿感染（Hobman，2013）。阐明RuV进入的分子机制对于了解病毒病理学和帮助开发抗RuV药物是必不可少的。虽然以前的研究表明宿主细胞的膜脂质作为RuV受体（Mastromarino et al。，1989和1990; DuBois et ...
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| Evaluation of the Condition of Respiration and Photosynthesis by Measuring Chlorophyll Fluorescence in Cyanobacteria
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Author:
Date:
2018-05-05
[Abstract] Chlorophyll fluorescence measurements have been widely used to monitor the condition of photosynthesis. Furthermore, chlorophyll fluorescence from cyanobacteria reflects the condition of respiration, since cyanobacterial photosynthesis shares several components of electron transport chain with respiration. This protocol presents the method to monitor the condition of both photosynthesis and respiration in cyanobacteria simply by measuring chlorophyll fluorescence in the dark and in the light with pulse amplitude modulation (PAM) chlorophyll fluorometer.
[摘要] 叶绿素荧光测量已被广泛用于监测光合作用的状况。 此外，蓝细菌的叶绿素荧光反映了呼吸的状况，因为蓝藻光合作用与呼吸作用共享电子传递链的几个组成部分。 该协议提供了监测蓝藻光合作用和呼吸作用的方法，只需通过测量黑暗和光照下的叶绿素荧光以及脉冲幅度调制（PAM）叶绿素荧光计。
【背景】叶绿素荧光测量已广泛用于监测许多光合生物体的光合作用条件（Krause和Weis，1991; Govindjee，1995）。在蓝细菌的情况下，光合原核生物，叶绿素荧光不仅受光合作用条件的影响，而且还受其他代谢途径的影响，这是由于细胞内代谢途径之间的可能相互作用。特别是，光合作用和呼吸作用共享电子传递链的几个组成部分，如蓝细菌中的质体醌（PQ）（Aoki and Katoh，1982; Peschek and Schmetterer，1982）。 PQ池的氧化还原状态通过调节状态转变影响叶绿素荧光的产量（Mullineaux和Allen，1986; Mullineaux等人，1997），其是非天然存在的主要组分，蓝藻中的光化学猝灭（Campbell和Öquist，1996）。因此，蓝藻呼吸链直接影响叶绿素荧光，特别是在光合作用不活跃的黑暗中。
由于呼吸的影响，应谨慎测量叶绿素荧光以精确估计蓝藻中的光合作用（Ogawa et ...
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