| Fluorescence Measurement and Calibration of Intracellular pH in Starfish Oocytes
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Author:
Date:
2020-10-05
[Abstract] Oocyte maturation is a process wherein an oocyte arrested at prophase of meiosis I resumes meiosis to become a fertilizable egg. In starfish ovaries, a hormone released from follicle cells activates the oocytes, resulting in an increase in their intracellular pH (pHi), which is required for spindle assembly. Herein, we describe a protocol for pHi measurement in living oocytes microinjected with the pH-sensitive dye BCECF. For in vivo BCECF calibration, we treated oocytes with artificial seawater containing CH3COONH4 to clamp pHi, ...
[摘要] [摘要]卵母细胞成熟是在减数分裂I前期停滞的卵母细胞恢复减数分裂成为可受精卵的过程。在海星卵巢中，从卵泡细胞释放的激素激活卵母细胞，导致其胞内pH（pH i ）升高，这是纺锤体组装所必需的。在本文中，我们描述了在用pH敏感染料BCECF显微注射的活卵母细胞中测量pH i的方案。对于在体内BCECF校准，我们用含有CH人造海水的卵母细胞3 COONH 4到夹具的pH我 ，注入pH标准溶液，并将BCECF荧光强度比值转换为pH i值。值得注意的是，如果实际pH值我比注入标准溶液的pH值已知更高或更低时，BCECF的荧光强度比将分别减小或增大。另一方面，注入溶液的pH值没有显示出荧光强度的变化，应该认为是实际pH值i 。这些用于pH i校准和钳制的方法简单且可重现。
关键词：细胞内pH，BCECF ，卵母细胞，显微注射，海星，标定
[背景]细胞内pH （pH为我）测量为细胞生物学的研究中是非常有用的方法，因为pH值我起着在多种细胞过程中起重要作用，如配子活化（约翰逊和EPEL ，1976; Shen和斯坦哈特，1978 ;蒂尔尼等，1978 ），细胞分裂（Schuldiner和Rozengurt ，1982; Moolenaar译者等，1983;阿南德和普拉萨德，1989; ...
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| Purification of 70S Ribosomes from Bacillus subtilis
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Author:
Date:
2015-04-05
[Abstract] The eubacterial ribosome (70S) is a macromolecular complex that is composed of a small (30S) subunit and a large (50S) subunit. The small subunit comprises the 16S ribosomal RNA (rRNA) and more than 20 ribosomal proteins (r-proteins), whereas the large subunit comprises the 23S and 5S rRNAs and more than 30 r-proteins. Bacillus subtilis (B. subtilis) has 57 r-ribosomal protein genes and three rRNAs (16S, 23S and 5S rRNAs). Among them, we identified 21 r-proteins of the small subunit and 31 r-proteins of the large subunit in B. subtilis (Nanamiya et al., ...
[摘要] 真细菌核糖体（70S）是由小（30S）亚基和大（50S）亚基组成的大分子复合物。 小亚基包含16S核糖体RNA（rRNA）和超过20个核糖体蛋白（r-蛋白），而大亚基包含23S和5S rRNA和超过30个r蛋白。 枯草芽孢杆菌（<枯草芽孢杆菌）具有57个核糖体蛋白基因和三个rrna（16s，23s和5s rrna）。 其中，我们确定21 r蛋白的小亚基和31 r蛋白的大亚基在b。 枯草芽孢杆菌（nanamiya等人，2004）。 核糖体的各个组分的功能和作用尚未完全澄清。 在本文中，我们详细描述了从b的指数生长细胞制备70s核糖体的基于超速离心的方案。 枯草芽孢杆菌。
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