| Embryonic Intravitreous Injection in Mouse
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Author:
Date:
2018-07-20
[Abstract] Axons of retinal ganglion cells (RGCs) relay visual information from the retina to lateral geniculate nucleus (LGN) and superior colliculus (SC), which are two major image-forming visual nuclei. Wiring of these retinal projections completes before vision begins. However, there are few studies on retinal axons at embryonic stage due to technical difficulty. We developed a method of embryonic intravitreous injection of dyes in mice to visualize retinal projections to LGN and SC. This study opens up the possibility of understanding early visual circuit wiring in mice embryos.
[摘要] 视网膜神经节细胞（RGC）的轴突将视觉信息从视网膜传递到外侧膝状核（LGN）和上丘（SC），这是两个主要的成像视觉核。 在视力开始之前完成这些视网膜投射的布线。 然而，由于技术困难，很少有关于胚胎期视网膜轴突的研究。 我们开发了一种胚胎玻璃体内注射染料的方法，用于观察LGN和SC的视网膜投射。 这项研究开辟了理解小鼠胚胎早期视觉电路布线的可能性。
【背景】早在胚胎第14.5天（E14.5）小鼠中，视网膜轴突开始向LGN和SC投射。 为了研究胚胎中的轴突投射，需要在注射手术前保持胚胎存活至少10小时，玻璃内注射染料。 以前的研究表明，胚胎可以使用含氧小鼠血清进行体外培养。 然而，营养多样性，氧饱和度和温度调节等问题会影响胚胎的生理状况。 在我们的研究中，我们通过胚胎中的子宫壁和眼睑进行玻璃体内注射，并在注射后将它们保存在子宫中。 从E15.5到E18.5很好地标记了对LGN和SC的视网膜轴突投射。
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| Ex vivo Trophoblast-specific Genetic Manipulation Using Lentiviral Delivery
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Author:
Date:
2017-12-20
[Abstract] In this protocol report, we describe a lentiviral gene delivery technique for genetic modification of the rat trophoblast cell lineage. Lentiviral packaged gene constructs can be efficiently and specifically delivered to the trophoblast cell lineage of the blastocyst. The consequences of ‘gain-of-function’ and ‘loss-of-function’ blastocyst manipulations can be evaluated with in vitro outgrowth assays or following transfer to pseudopregnant rats.
[摘要] 在这个协议报告中，我们描述了一种慢病毒基因传递技术的基因修改大鼠滋养细胞谱系。 慢病毒包装的基因构建体可以有效地和特异性地递送至胚泡的滋养层细胞谱系。 “功能获得”和“功能丧失”囊胚操作的后果可以用体外生长测定或转移到假孕大鼠后进行评估。
【背景】胎盘作为母亲和发育中的胎儿之间的通道，对于胎儿生殖是必不可少的（Georgiades et。，<2002>）。它是专门用于促进和协调母体对妊娠和胎儿发育的适应性（Soares等人，2014; Burton等人，2016）。胎盘含有滋养层细胞，它们执行多种特殊功能。滋养层细胞特化的获得需要高度调控的滋养层干细胞和祖细胞群的分化（Maltepe and Fisher，2015）。成熟的大鼠胎盘由两个形态上和功能上不同的区室组成：交界区和迷宫区（Soares等人，2012）。祖细胞，海绵状滋养层细胞，糖原滋养层细胞和多倍体滋养层巨细胞构成交界区。侵入性滋养层谱系来自交界区内的祖细胞（Ain等人，2003; Soares等人，2014）。在妊娠的最后一周，这些细胞移出胎盘并侵入母体子宫隔膜室（Ain等人，2003; ...
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| Isolation of Rice Stripe Virus Preparation from Viruliferous Small Brown Planthoppers and Mechanic Inoculation on Rice
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Author:
Date:
2017-11-05
[Abstract] Tenuiviruses can infect the plants of the family Poaceae, and cause serious loss of crops, particularly rice and maize, in South-Eastern Asian countries. Tenuiviruses usually depend on insect vectors for their transmission and cannot be transmitted between plants through wounds or abrasions. Rice stripe virus (RSV), a typical member of tenuiviruses, is efficiently transmitted by the small brown planthopper Laodelphax striatellus in a persistent-propagative manner to cause rice stripe disease. Here we presented a convenient method, the midrib micro-injection, to mechanically ...
[摘要] 细菌病毒可以感染禾本科植物，并在东南亚国家造成严重的作物损失，特别是稻米和玉米。 病毒通常依靠昆虫载体传播，不能通过伤口或擦伤传播。 水稻条纹病毒（RSV）是典型的tenuiviruses的成员，以持续繁殖的方式被小型褐飞虱灰飞虱高效率地传播，导致水稻条纹病。 在这里，我们提出了一种方便的方法，即中微量注射，以机械方式将昆虫来源的RSV接种到水稻叶中，以对水稻植物进行致病性测定。
【背景】除非通过根据不同的实验细节从1％至90％的完全不同的传输速率进行血管穿刺接种（Louie，1995; Hogenhout等人，2008），否则不能将机器接种到植物中。至于RSV，机械传播通常失败或产生低感染率（Ling，1972）。特别地，从病变植物注射RSV粗提物后，传播率仅为6％（Okuyama and Asuyama，1959）。在这项工作中提到的中微注射方法将RSV传播率提高到17％。虽然机械传播RSV的发生率仍远低于昆虫载体传播（53％），但是我们的方法为持续繁殖的植物病毒的机械接种提供了便利的方法。此外，基于这种方法，可以在受感染的植物宿主中更精确地确定持续增殖植物病毒的复制和基因表达，而不受昆虫即接种剂量和昆虫蛋白质的干扰。
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