Long-term in vitro Culture of Cryptosporidium parvum
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Date:
2018-08-05
[Abstract] Continuous in vitro growth of Cryptosporidium parvum has proved difficult and conventional in vitro culture techniques result in short-term (2-5 days) growth of the parasite resulting in thin-walled oocysts that fail to propagate using in vitro cultures, and do not produce an active infection using immunosuppressed or immunodeficient mouse models (Arrowood, 2002). Here we describe the use of hollow fiber bioreactors (HFB) that simulate in vivo conditions by providing oxygen and nutrients to host intestinal cells from the basal surface and permit ...
[摘要] Cryptosporidium parvum 的连续体外生长已证明是困难的,并且常规体外培养技术导致短期(2-5天)生长寄生虫导致薄壁卵囊不能使用体外培养物繁殖,并且不使用免疫抑制或免疫缺陷小鼠模型产生活跃感染(Arrowood,2002)。在这里,我们描述了中空纤维生物反应器(HFB)的使用,通过提供氧气和营养物质从基础表面宿主肠细胞模拟体内条件,并允许建立低氧化还原,高营养环境顶面。当接种10 5 C时。 parvum (爱荷华州分离物)卵囊生物反应器在14天后每ml产生10个 8 卵囊(20ml额外毛细血管体积),并保持2年以上。使用TCR-α免疫缺陷小鼠模型的体内感染性研究显示,在6,12和18个月时从生物反应器产生的卵囊与用于启动培养的亲本Iowa分离物无法区分。 HFB产生的卵囊具有与亲本爱荷华分离物类似的百分比分析。
【背景】 Cryptosporidium parvum 是人和其他哺乳动物肠道的细胞内专性寄生虫,导致急性腹泻。该疾病在免疫功能正常的个体中是自限性的,然而,在免疫功能低下的成人和幼儿中,该疾病可能危及生命(Kotloff,2017)。它是经济资源低的国家中三种被诊断出的儿童肠道疾病之一(Kotloff et al。,2013; Sow et ...
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Induction and Quantification of Patulin Production in Penicillium Species
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Date:
2017-06-05
[Abstract] Patulin, a worldwide regulated mycotoxin, is primarily produced by Penicillium and Aspergillus species during fruit spoilage. Patulin contamination is a great concern with regard to human health because exposure of the mycotoxin can result in severe acute and chronic toxicity, including neurotoxic, mutagenic, and immunotoxic effects. Penicillium expansum is known as the main producer of patulin. This protocol addresses the cultivation procedure of P. expansum under patulin permissive conditions and describes the method of collection and detection of patulin.
[摘要] Patulin是世界范围内调节的真菌毒素,主要是在水果腐败期间由青霉菌和曲霉菌种生产的。蛋白污染是人类健康的重大问题,因为霉菌毒素的暴露会导致严重的急性和慢性毒性,包括神经毒性,诱变性和免疫毒性作用。青霉素被称为patulin的主要生产者。该协议涉及到P的培育程序。膨化条件下的膨胀,并描述了patulin的收集和检测方法。
背景 丙氨酸是一种聚酮内酯霉菌毒素,是由几种真菌,包括青霉菌,曲霉菌和其他物种产生的。其中,广西青霉菌是一种着名的收获后病原体,在贮存期间引起了果皮果实的腐烂,是主要的生产者。由于毒素引起的严重急性和慢性作用,苹果产品中的蛋白酶水平受到极大的关注。因此,世界上许多国家的食品中的蛋白质水平有限。欧盟委员会(2006年)确定了苹果汁(50μg/ kg),固体苹果产品(25μg/ kg),最重要的是果实婴儿食品(10μg/ kg)的最高允许水平,因为儿童苹果衍生产品的主要消费者。  近年来对青霉素的研究主要集中在调节蛋白质生产的环境因素,patulin生物合成的分子基础和patulin的生物降解。在这些研究中,嘌呤产生的诱导和定量的方法是重要的。水果中的蛋白质分析通常遵循AOAC方法995.10(Brause等人,1996)。用果胶酶处理后,用醋酸乙酯从果实的腐烂部分提取白蛋白。已经开发了许多用于测量patulin的方法,例如TLC,质谱和气相色谱/质谱。现在,使用紫外光检测(HPLC-UV)的高效液相色谱法是最常用的方法(Baert等人,2007)。 ...
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Preparation of Recombinant Galectin-3 for Cancer Studies
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2016-01-05
[Abstract] Galectin-3 is a member of a class of proteins termed Galectins, characterized by their ability to bind glycans containing β-galactose (Cummings and Liu, 2009). Galectin-3 binds preferentially to proteoglycans terminating with N-acetyllactosamine (LacNAc) chains (i.e., tandem repeats of galactose) (Newlaczyl and Yu, 2011). Galectin-3 is unique among the galectins in its chimeric structure. It shares a conserved carbohydrate recognition domain (CRD) with the other galectins, but has a long amino-terminal tail that is thought to be involved in protein aggregation. It can also form ...
[摘要] Galectin-3是称为Galectins的一类蛋白质的成员,其特征在于它们结合含有β-半乳糖的聚糖的能力(Cummings和Liu,2009)。 Galectin-3优先结合以N-乙酰乳糖胺(LacNAc)链(即半乳糖的串联重复)终止的蛋白聚糖(Newlaczyl和Yu,2011)。 Galectin-3在其嵌合结构中的半乳凝素中是独一无二的。它与其他半乳凝素共享保守的碳水化合物识别结构域(CRD),但具有被认为参与蛋白质聚集的长氨基末端尾部。它也可以通过CRD形成同型二聚体(Cummings和Liu,2009)。已经发现Galectin-3在肿瘤发生中具有多种功能,包括:信号转导,凋亡抑制,免疫抑制,细胞生长和转移等。 ...
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