| Two Different Methods of Quantification of Oxidized Nicotinamide Adenine Dinucleotide (NAD+) and Reduced Nicotinamide Adenine Dinucleotide (NADH) Intracellular Levels: Enzymatic Coupled Cycling Assay and Ultra-performance Liquid Chromatography (UPLC)-Mass Spectrometry
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Author:
Date:
2018-07-20
[Abstract] Current studies on the age-related development of metabolic dysfunction and frailty are each day in more evidence. It is known, as aging progresses, nicotinamide adenine dinucleotide (NAD+) levels decrease in an expected physiological process. Recent studies have shown that a reduction in NAD+ is a key factor for the development of age-associated metabolic decline. Increased NAD+ levels in vivo results in activation of pro-longevity and health span-related factors. Also, it improves several physiological and metabolic parameters of aging, including ...
[摘要] 目前关于代谢功能障碍和虚弱的年龄相关发展的研究每天都有更多的证据。众所周知，随着衰老的进展，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD + ）水平在预期的生理过程中降低。最近的研究表明，NAD + 的减少是与年龄相关的代谢衰退发展的关键因素。增加NAD + 水平体内导致激活寿命和健康跨度相关因素。此外，它改善了老化的几个生理和代谢参数，包括自然和加速老化的小鼠模型中的肌肉功能，运动能力，葡萄糖耐量和心脏功能。
鉴于监测细胞NAD + 和NADH水平的重要性，有一个值得信赖的方法是至关重要的。该方案的目的是在有效且广泛适用的测定中描述来自组织和细胞的NAD + 和NADH提取以及其图形和定量分析。
【背景】氧化烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD + 和NADH）是重要的生物辅助因子，它们在几种合成代谢和分解代谢功能中提供和接受电子。它们参与诸如糖酵解，三羧酸循环和氧化磷酸化的反应。此外，它还作为DNA损伤修复中涉及的几种酶的底物，例如sirtuins和poly（ADP-核糖）聚合酶（PARP）（Imai和Guarente，2014; Verdin，2015; Yoshino et al。 ，2018）。
NAD + ...
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| Protocols to Study Declarative Memory Formation in Mice and Humans: Optogenetics and Translational Behavioral Approaches
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Author:
Azza Sellami, Alice Shaam Al Abed, Laurent Brayda-Bruno, Nicole Etchamendy, Stéphane Valério, Marie Oulé, Laura Pantaléon, Valérie Lamothe, Mylène Potier, Katy Bernard, Maritza Jabourian, Cyril Herry, Nicole Mons and Aline Marighetto,
Date:
2018-06-20
[Abstract] Declarative memory formation depends on the hippocampus and declines in aging. Two functions of the hippocampus, temporal binding and relational organization (Rawlins and Tsaltas, 1983; Eichenbaum et al., 1992; Cohen et al., 1997), are known to decline in aging (Leal and Yassa, 2015). However, in the literature distinct procedures have been used to study these two functions. Here, we describe the experimental procedures used to investigate how these two processes are related in the formation of declarative memory and how they are compromised in aging (Sellami et al., ...
[摘要] 陈述性记忆的形成取决于海马体和老化程度的下降。已知海马，时间结合和关系组织的两种功能（Rawlins和Tsaltas，1983; Eichenbaum等人，1992; Cohen等人，1997），已知老龄化下降（Leal和Yassa，2015）。但是，在文献中已经使用不同的程序来研究这两个功能。在这里，我们描述了用于研究这两个过程如何与陈述性记忆的形成以及它们如何在衰老中受到损害有关的实验程序（Sellami et。，2017）。首先，我们使用单一试验性学习程序研究了时间绑定：追踪恐惧条件反射。这是经典的巴甫洛夫条件需要时间约束，因为短暂的时间间隔将条件刺激（CS）和无条件刺激（US）呈现分开。我们将追踪恐惧条件程序与光遗传学方法相结合，并且我们表明时间依赖性依赖于背侧（d）CA1活性在时间间隙上的依赖性。然后，我们研究了时间绑定和关系组织之间在声明性记忆形成中的相互作用，这种相互作用使用了小鼠中的两阶段径向迷宫任务及其在人类中的虚拟类比。行为过程包括一个初始学习阶段，在这个阶段中，受试者获得每个手臂持续的奖励/无奖赏价值，然后是测试阶段，其中武器中的奖励突发事件保持不变，但武器重新组合以评估灵活性，陈述性记忆。我们证明了dCA1依赖的时间结合对于记忆的关系组织的发展是必需的，这允许灵活的陈述记忆表达。此外，在衰老过程中，陈述性记忆的退化是由于时间约束能力的减少而阻碍了关系组织。 ...
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| Detection of Catalase Activity by Polyacrylamide Gel Electrophoresis (PAGE) in Cell Extracts from Pseudomonas aeruginosa
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Author:
Date:
2018-06-05
[Abstract] Bacteria in nature and as pathogens commonly face oxidative stress which causes damage to proteins, lipids and DNA. This damage is produced by the action of reactive oxygen species (ROS) such as hydrogen peroxide (H2O2), singlet oxygen, superoxide anion and hydroxyl radical. ROS are generated by antimicrobials, environmental factors (e.g., ultraviolet radiation, osmotic stress), aerobic respiration, and host phagocytes during infective processes. Pseudomonas aeruginosa, a versatile bacterium, is a prevalent opportunistic human pathogen which possesses ...
[摘要] 自然界中的细菌和病原体通常会面临氧化应激，导致蛋白质，脂质和DNA的损伤。 这种损害是由活性氧（ROS）如过氧化氢（H 2 O 2 2），单线态氧，超氧阴离子和羟基自由基的作用产生的。 ROS在感染过程中由抗菌剂，环境因素（例如，紫外线辐射，渗透压力），有氧呼吸和宿主吞噬细胞产生。 铜绿假单胞菌是一种多功能细菌，是一种普遍的机会性人类病原体，其具有针对ROS的几种防御策略。 其中，两种过氧化氢酶（KatA和KatB）在防御多种类型的压力方面的作用得到了很好的表征。 在该协议中，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）检测KatA和KatB活性。 还有人认为KatB的检测是难以捉摸的。
【背景】 P上。铜绿假单胞菌是一种无处不在的细菌，它可以以游离形式在陆地和水生栖息地中发现，或作为机会性人类病原体在免疫功能低下的个体，皮肤损伤或囊性纤维化患者中引起致命性感染。为了抵御其有氧代谢产生的ROS，寄主吞噬泡和环境因素，这种微生物具有多种抗氧化策略。其中，两个单功能的过氧化氢酶（KatA和KatB）负责将H 2 O分解成水和O 2。 KatA是主要的过氧化氢酶并具有独特的特征：它对H 2 O 2抗性，渗透保护和毒力非常稳定并且是必不可少的（Hassett等人 2000; Lee等人，2005）。有人认为，KatA的稳定性是正常生长条件下高水平活性的主要因素之一，因此， ...
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