| Detection of Catalase Activity by Polyacrylamide Gel Electrophoresis (PAGE) in Cell Extracts from Pseudomonas aeruginosa
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Author:
Date:
2018-06-05
[Abstract] Bacteria in nature and as pathogens commonly face oxidative stress which causes damage to proteins, lipids and DNA. This damage is produced by the action of reactive oxygen species (ROS) such as hydrogen peroxide (H2O2), singlet oxygen, superoxide anion and hydroxyl radical. ROS are generated by antimicrobials, environmental factors (e.g., ultraviolet radiation, osmotic stress), aerobic respiration, and host phagocytes during infective processes. Pseudomonas aeruginosa, a versatile bacterium, is a prevalent opportunistic human pathogen which possesses ...
[摘要] 自然界中的细菌和病原体通常会面临氧化应激，导致蛋白质，脂质和DNA的损伤。 这种损害是由活性氧（ROS）如过氧化氢（H 2 O 2 2），单线态氧，超氧阴离子和羟基自由基的作用产生的。 ROS在感染过程中由抗菌剂，环境因素（例如，紫外线辐射，渗透压力），有氧呼吸和宿主吞噬细胞产生。 铜绿假单胞菌是一种多功能细菌，是一种普遍的机会性人类病原体，其具有针对ROS的几种防御策略。 其中，两种过氧化氢酶（KatA和KatB）在防御多种类型的压力方面的作用得到了很好的表征。 在该协议中，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）检测KatA和KatB活性。 还有人认为KatB的检测是难以捉摸的。
【背景】 P上。铜绿假单胞菌是一种无处不在的细菌，它可以以游离形式在陆地和水生栖息地中发现，或作为机会性人类病原体在免疫功能低下的个体，皮肤损伤或囊性纤维化患者中引起致命性感染。为了抵御其有氧代谢产生的ROS，寄主吞噬泡和环境因素，这种微生物具有多种抗氧化策略。其中，两个单功能的过氧化氢酶（KatA和KatB）负责将H 2 O分解成水和O 2。 KatA是主要的过氧化氢酶并具有独特的特征：它对H 2 O 2抗性，渗透保护和毒力非常稳定并且是必不可少的（Hassett等人 2000; Lee等人，2005）。有人认为，KatA的稳定性是正常生长条件下高水平活性的主要因素之一，因此， ...
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| Arabidopsis Seed Germination Assay with Gibberellic Acid
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Author:
Date:
2016-11-20
[Abstract] This assay analyzes Arabidopsis seed germination in response to gibberellic acid (GA). During seed imbibition, visible physiological changes allow precise determination of germination rate. This protocol utilizes a stereoscopic microscope to improve characterization of seed germination process.
[摘要] 该测定分析响应于赤霉酸（GA）的拟南芥种子萌发。在种子吸水期间，可见的生理变化允许精确测定发芽率。该协议利用立体显微镜来改善种子发芽过程的表征。
[背景] 种子萌发是由植物激素（如GA和脱落酸（ABA））和环境因素控制的植物生命周期的关键过程。种子萌发包括两个生理过程，包括种皮（睾丸）和胚乳破裂。通常，胚乳通过胚根的渗透表明萌发是完全的。以前的研究通常使用胚乳破裂来计算发芽率。然而，种皮破裂也测量种子发芽的进展。该协议利用立体显微镜提供种子发芽的可见和精确计算，包括种皮和胚乳破裂的速率（Zhong等人，2015）。
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| Expression, Purification and Enzymatic Assay of Plant Histone Deacetylases
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Author:
Date:
2016-04-05
[Abstract] Histone deacetylases (HDACs) catalyzing the removal of acetyl groups from lysine residues of histone and non-histone proteins play vital roles in regulation of gene transcription. In plants, HDACs can be grouped into three families, including RPD3-type, SIR2-type and plant specific HD2-type HDACs. Here we describe a method to determine plant HDAC enzymatic activity. This protocol includes expression, purification and enzymatic activity assay of recombinant plant HDACs expressed in Escherichia coli (E. coli) and Arabidopsis thaliana (A. thaliana).
[摘要] 组蛋白脱乙酰酶（HDAC）催化从组蛋白和非组蛋白蛋白的赖氨酸残基去除乙酰基在调节基因转录中起重要作用。 在植物中，HDAC可以分为三个家族，包括RPD3型，SIR2型和植物特异性HD2型HDAC。 在这里我们描述了一种确定植物HDAC酶活性的方法。 该方案包括在大肠杆菌（大肠杆菌）和拟南芥（）中表达的重组植物HDAC的表达，纯化和酶活性测定 >拟南芥）。
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