| Analysis of L- and D-Amino Acids Using UPLC
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Author:
Date:
2014-09-05
[Abstract] With the exception of glycine, α-amino acids are optically active, and two optical isomers (L- and D-) of each amino acid can be formed. Recent developments of analytical techniques have revealed that several free D-amino acids such as D-aspartate, D-serine and D-alanine exist in many kinds of organism including human and have biologically important roles. D-Aspartate regulates reproductive activity in animals and humans. D-Serine serves as a co-agonist of the N-methyl-D-aspartate receptor, which mediates glutamatergic neurotransmission. D-Alanine plays a role like osmolyte in ...
[摘要] 除了甘氨酸，α-氨基酸具有光学活性，并且可以形成每个氨基酸的两种光学异构体（L-和D-）。分析技术的最新发展表明，几种游离D-氨基酸如D-天冬氨酸，D-丝氨酸和D-丙氨酸存在于包括人在内的许多种生物中，并且具有生物学上的重要作用。 D-天冬氨酸调节动物和人的生殖活性。 D-丝氨酸作为Nε-甲基-D-天冬氨酸受体的共激动剂，其介导谷氨酸能神经传递。 D-丙氨酸在甲壳类动物和软体动物中起到类似渗透物的作用。在该协议中，我们描述了使用超高效液相色谱（UPLC）分析L-和D-氨基酸的方法。为了分析D-和L-氨基酸，首先将对映异构体转化为非对映异构体（非对映异构体是与物镜和镜像无关的立体异构体，并且不是对映异构体），使用前柱衍生化，邻苯二甲醛加上Nε - 酰化的半胱氨酸（Nε - 乙酰基-L-半胱氨酸或Nε - 叔丁基氧羰基-L 。所得衍生物是荧光非对映异构体。然后使用UPLC在十八烷基硅烷基固定相上分离所得荧光异吲哚衍生物，并通过包括在UPLC系统中的荧光检测器检测荧光。使用该方法，可以分析16种D-氨基酸。
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| Surface Plasmon Resonance Analysis of Antigen-Antibody Interaction
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Author:
Date:
2013-12-20
[Abstract] Molecular interaction between monoclonal antibodies (MAbs) and their recognized antigen is a fundamental event leading to the neutralization activity. Estimation of their binding affinity gives beneficial information to characterize the MAbs and to develop more effective MAbs. Surface plasmon resonance (SPR) analysis is a powerful tool to analyze the molecular interaction, enabling rapid and repetitive estimation with relatively small amount of sample. Here we describe a general protocol about SPR analysis on the interaction between viral antigen and human MAb (HuMAb) IgG. Anti-human Fcγ is ...
[摘要] 单克隆抗体（MAb）与其识别的抗原之间的分子相互作用是导致中和活性的基本事件。 它们的结合亲和力的估计给出了表征MAb和产生更有效的MAb的有益信息。 表面等离子体共振（SPR）分析是分析分子相互作用的有力工具，使得能够用相对少量的样品进行快速和重复的估计。 在这里我们描述关于病毒抗原和人类MAb（HuMAb）IgG之间的相互作用的SPR分析的一般协议。 抗人Fcγ首先通过胺偶联在传感器芯片上共价交联，然后通过抗FcγMAbIgG相互作用作为配体固定目标HuMAb。 注射在传感器芯片上的抗原导致作为结合和解离的结果的时间过程中的SPR变化。 通过分析动力学，获得结合速率，解离速率和解离常数。
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