Generation of the Compression-induced Dedifferentiated Adipocytes (CiDAs) Using Hypertonic Medium
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Author:
Date:
2021-02-20
[Abstract] Current methods to obtain mesenchymal stem cells (MSCs) involve sampling, culturing, and expanding of primary MSCs from adipose, bone marrow, and umbilical cord tissues. However, the drawbacks are the limited numbers of total cells in MSC pools, and their decaying stemness during in vitro expansion. As an alternative resource, recent ceiling culture methods allow the generation of dedifferentiated fat cells (DFATs) from mature adipocytes. Nevertheless, this process of spontaneous dedifferentiation of mature adipocytes is laborious and time-consuming. This paper describes a modified protocol ...
[摘要] [摘要]目前的方法,以获得间充质干细胞(MSC)包括采样,培养,和扩大主要由脂肪,骨髓,和脐带组织的MSCs。然而,缺点是在总细胞在MSC池,和它们的衰减干性的数量有限在维生素- [R Ò扩张。作为替代资源,最近的天花板培养方法允许从成熟的脂肪细胞中生成去分化的脂肪细胞(DFAT)。然而,这种成熟脂肪细胞自发去分化的过程既费力又费时。本文描述了一种用于经修改协议在体外通过采用附加的物理刺激,其中脂肪细胞去分化TA KES扩充所述干性相关的优点的Wnt /β-catenin信号。具体来说,该协议利用含聚乙二醇(PEG)的高渗介质引入细胞外物理刺激以获得更高的效率,并引入更简单的脂肪细胞去分化程序。
[背景]脂肪组织由于其丰度大且侵袭性相对较低,因此是间充质干细胞(MSC)最具吸引力的来源之一(Shen等,2011 ;González-Cruz等,2012; Konno等人,2013)。脂肪来源的MSC,即从皮下脂肪组织的基质血管级分中分离,已被证实同时显示多谱系潜能的体外和体内(Anghileri等人,2008;冈萨雷斯。等人,2009;冈萨雷斯-雷伊等等人,2010; Jumabay等人,2010; Mao等人,2017和2019 ;Darnell等人,2018 ...
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Generation of Functional Mouse Hippocampal Neurons
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Author:
Date:
2020-08-05
[Abstract] Primary culture of mouse hippocampal neurons is a very useful in vitro model for studying neuronal development, axonal and dendritic morphology, synaptic functions, and many other neuronal features. Here we describe a step-by-step process of generating primary neurons from mouse embryonic hippocampi (E17.5/E18.5). Hippocampal neurons generated with this protocol can be plated in different tissue culture dishes according to different experimental aims and can produce a reliable source of pure and differentiated neurons in less than one week. This protocol covers all the steps ...
[摘要] [摘要] 原代培养小鼠海马神经元是一种非常有用的体外模型用于研究神经元的发育,轴突和树突的形态,突触功能,以及许多其他神经元的特征。这里我们描述了从小鼠胚胎海马(E17.5/E18.5)产生初级神经元的一步一步的过程。根据不同的实验目的,用该方法产生的海马神经元可以在不同的组织培养皿中进行培养,并能在不到一周的时间内产生一个可靠的来源。该方案涵盖了神经元培养物的制备、培养和鉴定的所有必要步骤,包括解剖器械的说明、胚胎分离的手术程序、培养条件以及培养物纯度和分化的评估。通过分析培养6天时的钙显像动力学来评估神经元的活性。
[背景] 海马体是一个非常典型的大脑结构,对重要的大脑功能如记忆、空间导航、情绪记忆和学习至关重要。从解剖学上讲,小鼠海马体有一个清晰的C形结构,很容易定位和分离。在细胞水平上,它主要由锥体细胞组成,与其他脑区相比,中间神经元和胶质细胞较少(Kaech和Banker,2006)。因此,海马体是从野生型或基因工程小鼠模型中产生高纯度原代神经元培养物的理想区域,可用于疾病建模或研究神经元功能的多个方面,如突触传递和电生理特性、对神经毒性的敏感性,分化与衰老(;;;;)。Busche,2018Koyama和Ikegaya,2018Molnar,2011Wu等人,2019Rush等人,2020年
已经制定了许多协议,通过与神经胶质喂食器共同培养神经元来产生皮层和海马神经元(Kaech和Banker,2006),描述了用水凝胶微纤维封装的星形胶质细胞的三维神经元培养系统(Kim等人,2020年),长期向培养基中补充生长因子神经元培养(Ray ...
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Methodology for in vitro Assessment of Human T Cell Activation and Blockade
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Author:
Date:
2020-06-05
[Abstract] Methods to test both the functionality and mechanism of action for human recombinant proteins and antibodies in vitro have been limited by multiple factors. To test the functionality of a recombinant protein or antibody, the receptor, the receptor-associated ligand, or both must be expressed by the cells present within the in vitro culture. While the use of transfected cell lines can circumvent this gap, the use of transfected cell lines does not allow for studying the native signaling pathway(s) modulated by the specific recombinant protein or antibody in primary cells. The ...
[摘要] [摘要 ] 在体外测试人重组蛋白和抗体的功能和作用机理的方法受到多种因素的限制。要测试重组蛋白或抗体的功能,是受体,受体相关配体或两者它必须由体外培养物中存在的细胞表达,尽管使用转染的细胞系可以规避这一差距,但使用转染的细胞系并不能研究由特定重组蛋白或重组蛋白调控的天然信号通路(S)。抗体原代细胞,本协议利用排序纯化的CD14 Tasu 单核细胞和T细胞,这两种CD4 Tasu T细胞和CD8 Tasu T细胞,从他ALTH Ÿ 的捐助方共培养体系。这种方法特别相关的测试重组镨大肠菌素或抗体,是用于治疗自身免疫性疾病和癌症的推定疗法。目前的研究方案着重于含有B7-H4表达蛋白的共培养物 上皮细胞加上自体CD4 + T细胞或CD8 + T细胞,可以根据用户的特定需求修改方案。
背景 ] 临床使用检查点抑制剂治疗的,例如,抗CTLA-4和抗PD-1,已被证明可用作癌症治疗以增强抗肿瘤的免疫应答(柯伦等人,2010; 顾彬等等人,2014年),尽管在一线治疗失败的患者中获得成功,但仅约20%的接受治疗的患者对检查点抑制剂抗体治疗产生了反应,这种对患者无效的治疗可能是多因素的,也可能反映了特定类型。患者向临床医生提出的癌症( Podojil等人,2020)。肿瘤细胞中存在的肿瘤细胞和单核细胞/巨噬细胞表达B7- ...
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