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Sodium chloride

氯化钠AnalaR NORMAPUR ACS

公司名称: VWR
产品编号: 27810.295
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Other protocol()

Induction of Epithelial-mesenchymal Transition in MDCK II Cells
Author:
Date:
2021-02-05
[Abstract]  

Epithelial-mesenchymal transition (EMT) is a reversible process of epithelial cell transdifferentiation into a mesenchymal cell, that enables initiation of cell migration. EMT plays an important role in embryonic development, tissue repair and cancer metastasis. Better understanding of cellular and molecular events during EMT will not only provide novel insights on how mammalian organism develops and how epithelial tissues regenerate, but also can identify novel therapeutic targets for cancer therapy. Here we aim to provide a detailed protocol on how to induce EMT in Madin-Darby Canine Kidney

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[摘要]  [摘要]上皮-间质转化(EMT)是上皮细胞向分化为间充质细胞的可逆过程,能够启动细胞迁移。EMT在胚胎发育,组织修复和癌症转移中起着重要作用。更好地了解EMT过程中的细胞和分子事件,不仅将为哺乳动物生物的发育以及上皮组织的再生提供新颖的见解,而且还可为癌症治疗确定新的治疗靶标。在这里,我们旨在提供有关如何在Madin-Darby犬肾脏(MDCK)II上皮细胞系中诱导EMT并在EMT诱导的细胞上进行免疫荧光染色的详细协议。


[背景]上皮细胞的特征在于细胞可塑性,即具有采用不同细胞表型的能力(Carter等,2019; Yuan等,2019)。上皮-间质转化(EMT)是上皮细胞可塑性的一种形式。在EMT期间,上皮细胞会破坏细胞间连接,使其极性失去作用,并从鳞状,长方体或柱状变为梭形并迁移,从而获得间充质细胞的特性(Kalluri和Weinberg,2009)。EMT可以通过免疫染色和测量标志物(例如E-钙粘蛋白,ZO-1,波形蛋白,纤连蛋白和N-钙粘蛋白)的表达水平进行评估(Kalluri和Weinberg,2009)。在过去十年中在EMT研究中心大多的转录因子的作用例如,SNAIL1 / 2,ZEB1 / ...

Optimized Immunostaining of Embryonic and Early Postnatal Mouse Brain Sections
Author:
Date:
2021-01-05
[Abstract]  

The mammalian neocortex, the outer layer of the cerebrum and most recently evolved brain region, is characterized by its unique areal and laminar organization. Distinct cortical layers and areas can be identified by the protein expression of graded transcription factors and molecular determinants that define the identity of different projection neurons. Thus, specific detection and visualization of protein expression is crucial for assessing the identity of neocortical neurons and, more broadly, for understanding early and late developmental mechanisms and function of this complex system.

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[摘要]  [摘要]哺乳动物的新皮层是大脑的外层,也是最近进化的大脑区域,其特征在于其独特的区域和层状组织。不同的皮质层和区域可以通过分级转录因子的蛋白质表达和定义不同投射神经元身份的分子决定簇来鉴定。因此,蛋白质表达的特异性检测和可视化对于评估新皮层神经元的身份至关重要,更广泛地来说,对于理解这个复杂系统的早期和晚期发育机制和功能至关重要。一些 存在免疫染色/免疫荧光方法来检测蛋白质表达。已发布的方案在细节方面有所不同,可能会影响免疫荧光的最终结果。在这里,我们提供了详细的协议,适用于低温恒温器薄切片和厚振动切片器薄切片,该协议已成功地开发了针对新皮质发育关键分子的抗体。从早期的技术措施测距的大脑采集到的图像分析和统计,我们包括有关样品包容和每一个细节部分ING,幻灯片存储和旨在减少非特异性背景最佳抗体稀释。在实验室中常规使用的,我们的背景优化的免疫染色协议允许区域的有效检测-和层-独特新皮层投射神经元的特定的分子决定因素。



图形摘要:





优化的小鼠脑切片免疫染色方案的工作流程图。一。一个流程图的不同步骤的优化免疫染色协议薄低温恒温器和厚振动切片。乙。例如,用于在薄冠状免疫染色对SATB2和CTIP2部(20 μ ...

A Highly Sensitive Anion Exchange Chromatography Method for Measuring cGAS Activity in vitro
Author:
Date:
2018-10-20
[Abstract]  Cyclic GMP-AMP synthase (cGAS) is a pattern recognition receptor (PRR) that senses double stranded DNA (dsDNA) in the cytosol and this leads to the activation of stimulator of interferon genes (STING) via the secondary messenger 2’3’-cyclic GMP-AMP (2’3’-cGAMP). STING then recruits TANK binding kinase 1 (TBK-1) and this complex can phosphorylate and activate interferon regulatory factor 3 (IRF3) leading to the induction of type I interferons and other antiviral genes. The cGAS:DNA complex catalyzes the synthesis of 2’3’-cGAMP and the purpose of the protocol presented here is to measure the in ... [摘要]  环状GMP-AMP合酶(cGAS)是一种模式识别受体(PRR),可以感知胞质溶胶中的双链DNA(dsDNA),并通过第二信使2'3'来激活干扰素基因刺激物(STING)。环GMP-AMP(2'3'-cGAMP)。然后STING募集TANK结合激酶1(TBK-1),该复合物可磷酸化并激活干扰素调节因子3(IRF3),导致I型干扰素和其他抗病毒基因的诱导。 cGAS:DNA复合物催化2'3'-cGAMP的合成,这里提出的方案的目的是测量在dsDNA存在下纯化的cGAS的体外>活性。开发该方案是为了阐明dsDNA长度与cGAS活性水平之间的关系。该方法涉及与低浓度cGAS和dsDNA的体外>反应,然后使用阴离子交换色谱法定量反应产物。当比较不同DNA片段激活cGAS的能力时,低浓度的cGAS和dsDNA以及该测定的高灵敏度是关键优势。

【背景】细胞胞质内存在双链DNA是DNA或逆转录病毒感染的潜在迹象。核苷酸转移酶cGAS作为感知细胞溶质dsDNA的模式识别受体起作用。 cGAS被dsDNA变构激活并催化ATP和GTP转化为环状二核苷酸2'3'-cGAMP(或简称cGAMP)(Ablasser et al。>,2013; Civril et al 。>,2013; Diner et al。>,2013; Gao et al。>,2013; ...

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