| Leaf Clearing Protocol to Observe Stomata and Other Cells on Leaf Surface
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Author:
Date:
2017-09-05
[Abstract] In this protocol, leaves are cleared and fixed in an ethanol and acetic acid solution, and mounted in Hoyer’s solution. The cleared leaves are imaged under differential interference contrast (DIC) microscope. This protocol is beneficial for studying stomata, hair cells, and other epidermal cells in plants.
[摘要] 在该方案中，将叶子清除并固定在乙醇和乙酸溶液中，并安装在Hoyer溶液中。 清除的叶片在差分干涉对比（DIC）显微镜下成像。 该方案有利于研究植物中的气孔，毛细胞和其他表皮细胞。
【背景】观察气孔和其他表皮细胞如植物叶片表面毛细胞有多种方法。 传统上，将明亮的指甲油或木胶施加到叶子表面并使其干燥。 将叶片剥离并在显微镜下观察。 或者，将透明胶带施加到叶子上并去除以观察叶表面的印记。 这些传统方法可用于坚固的较厚的叶子，但是图像通常不是最高质量的。 小而脆弱的叶如拟南芥叶需要更先进的方法。 还可以在显微镜下直接观察到新鲜的拟南芥或Brachypodium叶。 然而，叶片中的厚度和颜料在观察气孔和其他表皮细胞方面是困难的。 该协议描述了一种清除叶片，用于可视化包括其他表皮细胞在内的气孔的方法，并且获得了在同行评审期刊中出版的优质图像（Anderson，1954）。
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| Shoot Apical Meristem Size Measurement
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Author:
Date:
2016-12-05
[Abstract] The shoot apical meristem (SAM) is a collection of cells that continuously renew themselves by cell division and also provide cells to newly developing organs. It has been known that CLAVATA (CLV) 3 peptide regulates a transcription factor WUSCHEL (WUS) to keep numbers of undifferentiated cells constant and maintain the size of the SAM. The interactive feedback control of CLV3 and WUS in a non-cell autonomous signaling cascade determines stem cell fate (maintenance of pluripotency or, alternatively, differentiation into daughter cells) in the SAM. Ca2+ is a secondary messenger that ...
[摘要] 芽顶端分生组织（SAM）是通过细胞分裂不断更新自身的细胞的集合，并且还向新发育的器官提供细胞。已知CLAVATA（CLV）3肽调节转录因子WUSCHEL（WUS）以保持未分化细胞的数量恒定并维持SAM的大小。在非细胞自主信号级联中的CLV3和WUS的交互反馈控制确定SAM中的干细胞命运（多能性的维持，或者，分化成子细胞）。 Ca 2 + 是在许多信号传导途径中起重要作用的第二信使。连接CLV3结合其受体和WUS表达的信号系统没有很好地描绘。我们显示Ca 2 + 参与SAM大小的CLV3调节。我们使用的方法之一是测量SAM的大小。在这里，我们提供了一个详细的协议，如何用Nomarski显微镜测量拟南芥SAM大小。将代表SAM的最大"面"的二维圆顶的面积用作SAM大小的代表。在存在和不存在Ca 2+通道阻断剂Gd 3+和sLV 3肽的情况下对野生型（WT）拟南芥进行研究。 ，以及缺乏功能性CLV3（ clv3 ）或编码Ca 2+ 2+导电离子通道的基因（'dnd1 '）的基因型。 关键字： 拟南芥，射击顶端分生组织，苗发育，细胞信号，幼苗 > Nomarski显微镜广泛用于研究拟南芥SAM大小。用于SAM观察的其他显微技术是耗时的，并且需要将树脂嵌入树脂中，然后切片或甚至更复杂的显微镜。 ...
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| Hyaloperonospora arabidopsidis (Downy Mildew) Infection Assay in Arabidopsis
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Author:
Date:
2015-10-20
[Abstract] Hyaloperonospora arabidopsidis (Hpa; formerly Peronospora parasitica or Hyaloperonospora parasitica) is an oomycete downy mildew pathogen of the model plant Arabidopsis. The pathosystem between Arabidopsis and Hpa has been extensively used to study host/pathogen co-evolution (Coates and Beynon, 2010). As Hpa is an obligate biotrophic pathogen, its host is absolutely required for survival. Thus, Hpa must be maintained on susceptible Arabidopsis accessions and mutants. Growth of Hpa is evaluated ...
[摘要] （ Hpa ;以前为寄生寄生霜霉菌或寄生寄生虫）是模式植物的卵菌霜霉病病原体 拟南芥。 拟南芥和 Hpa之间的细胞系统已广泛用于研究宿主/病原体共进化（Coates和Beynon，2010）。 作为Hpa 是一种专性的生物营养性病原体，其宿主是生存所必需的。 因此，必须在易感的拟南芥登录号和突变体上维持 Hpa 。 生长Hpa 以两种方式评估： （Asai等人，2014）或在台盼蓝染色后计数孢子生成（Holt等人，2005）。 在这里，我们描述了如何用 Hpa 进行接种以及如何在拟南芥上评估 Hpa
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