| A Quick Method for Screening Biocontrol Efficacy of Bacterial Isolates against Bacterial Wilt Pathogen Ralstonia solanacearum in Tomato
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Author:
Date:
2020-11-20
[Abstract] Ralstonia solanacearum is a bacterial phytopathogen able to cause bacterial wilt disease in more than 200 plant species. Plant disease biocontrol strategies are used for controlling this disease and tomato is used as a model plant to conduct R. solanacearum associated studies. Conventional screening methods such as seed bacterization, soil drenching and root bacterization (in grown plants) to assess the ability of biocontrol bacteria to antagonize R. solanacearum under in planta conditions in different hosts are time-consuming and costly. A fast, cost effective method is a key requirement to ...
[摘要] [摘要]青枯雷尔氏菌是能够导致青枯病在超过2个细菌植物病原体00植物物种。植物病害生物防治策略用于控制这种疾病和番茄被用来作为模式植物进行青枯菌相关的研究。常规的筛选方法，例如种子杀菌，土壤浸湿和根部杀菌（在生长中的植物中），以评估生物控制细菌在不同宿主中在植物条件下拮抗青枯菌的能力，既耗时又昂贵。一个快速，经济有效的方法是推动研究的关键要求 青枯菌生物防治。在此协议中，我们已在细菌的分离株上接种了番茄幼苗的根，这些分离株在体外条件下显示出对茄青枯菌的拮抗活性。用拮抗细菌处理16小时后，通过成熟的根浸法将青枯菌接种到幼苗中。然后将幼苗保持在受控条件和枯萎/死苗的数目，记录最多10个天交ř 。青枯菌接种。从每个测试的分离物的记录计算生物防治效力。此协议是比在感测已经可用的协议的优点在于，它可以在很短的持续时间内完成（〜18天番茄）并且没有保持苗培养介质的需求。该方法可用于在短时间内以最小的成本快速筛选大量细菌分离株和不同宿主基因型。
[背景[ Ralstonia solanacearum ]是一种土壤传播的细菌性植物病原体，在200多个农作物中引起细菌性枯萎病，代表50个不同的科（Seleim等人，2014），其中大部分来自茄科（Thera等人，2010）。它可以在土壤中壮成长长达数年之久，并具有在寄主到达时感染的能力（Coutinho and ...
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| Purification of Protein-complexes from the Cyanobacterium Synechocystis sp. PCC 6803 Using FLAG-affinity Chromatography
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Author:
Date:
2020-05-20
[Abstract] Exploring the structure and function of protein complexes requires their isolation in the native state–a task that is made challenging when studying labile and/or low abundant complexes. The difficulties in preparing membrane-protein complexes are especially notorious. The cyanobacterium Synechocystis sp. PCC 6803 is a widely used model organism for the physiology of oxygenic phototrophs, and the biogenesis of membrane-bound photosynthetic complexes has traditionally been studied using this cyanobacterium. In a typical approach, the protein complexes are purified with a combination ...
[摘要] [摘要] 探索蛋白质复合物的结构和功能需要在天然状态下对其进行分离- 当研究不稳定和/或低丰度复合物时，这项任务变得具有挑战性。制备膜-蛋白质复合物的困难尤其出名。蓝藻集胞藻 PCC 6803是一种用于氧合营养养分生理的广泛使用的模式生物，传统上已经使用这种蓝细菌研究了膜结合的光合复合物的生物发生。在典型方法中，蛋白质复合物是通过His-affinity色谱法和基于大小的分级分离方法结合纯化的 例如梯度超速离心和/或天然电泳。但是，His亲和纯化带有明显的污染物，许多蛋白质的含量太低，无法进行可行的多步纯化。在这里，我们已经开发出一种纯化方法，用于从膜突囊藻的膜和可溶性级分中分离出3x FLAG标签的蛋白。可溶性蛋白或可溶类囊体经过单一亲和纯化步骤，该步骤利用FLAG亲和树脂的高度特异性结合。彻底洗涤后，使用过量的合成3x FLAG肽在自然条件下将捕获的蛋白质从树脂中释放出来。该方案可以快速分离出纯度极高的低丰度蛋白质复合物。
[背景 ] 蓝藻已被用作优选的模型系统以研究光合蛋白复合物的生物合成和功能的几十年。蓝细菌中的光合作用装置与真核系统（藻类和植物）非常相似，但是蓝细菌具有原核模型的所有优点，例如快速生长和小的基因组，可以轻松地进行基因操作以及使用细菌遗传学的标准工具。特别是，集胞藻。PCC ...
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| Plant Assays for Quantifying Ralstonia solanacearum Virulence
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Date:
2018-09-20
[Abstract] Virulence assays are powerful tools to study microbial pathogenesis in vivo. Good assays track disease development and, coupled with targeted mutagenesis, can identify pathogen virulence factors. Disease development in plants is extremely sensitive to environmental factors such as temperature, atmospheric humidity, and soil water level, so it can be challenging to standardize conditions to achieve consistent results. Here, we present optimized and validated experimental conditions and analysis methods for nine assays that measure specific aspects of virulence in the phytopathogenic ...
[摘要] 毒力测定是研究体内微生物发病机制的有力工具。 良好的分析跟踪疾病发展，并结合定向诱变，可以识别病原体毒力因子。 植物的疾病发展对环境因素如温度，大气湿度和土壤水位极其敏感，因此标准化条件以获得一致的结果可能具有挑战性。 在这里，我们提出优化和验证的实验条件和分析方法的九个测定，测量植物病原细菌 Ralstonia solanacearum 的毒力的特定方面，使用番茄作为模型宿主植物。
【背景】 Ralstonia solanacearum 是一种土壤传播的细菌，在广泛的植物中引起细菌枯萎，并继续感染全球的新宿主（Hayward，1991; Elphinstone，2005; Wicker et al。 ，2007; Genin，2010; Weibel et al。，2016）。结果， R. solanacearum 是研究最深入的植物致病菌之一（Mansfield et al。，2012）。
R上。 solanacearum 可以长期存在于土壤或水库中（Alvarez et ...
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