How to Catch a Smurf? – Ageing and Beyond…
In vivo Assessment of Intestinal Permeability in Multiple Model Organisms
|
|
Author:
Date:
2018-02-05
[Abstract] The Smurf Assay (SA) was initially developed in the model organism Drosophila melanogaster where a dramatic increase of intestinal permeability has been shown to occur during aging (Rera et al., 2011). We have since validated the protocol in multiple other model organisms (Dambroise et al., 2016) and have utilized the assay to further our understanding of aging (Tricoire and Rera, 2015; Rera et al., 2018). The SA has now also been used by other labs to assess intestinal barrier permeability (Clark et al., 2015; Katzenberger et al., 2015; ...
[摘要] Smurf分析（SA）最初是在模型生物黑腹果蝇中发现的，其中在老化过程中肠道通透性显着增加（Rera等人，2011年）。 我们已经验证了多种其他模式生物体的协议（Dambroise等人，2016），并利用该分析来进一步了解老化（Tricoire和Rera，2015; Rera等人 。，2018年）。 SA现在也被其他实验室用于评估肠道屏障通透性（Clark等人，2015; Katzenberger等人，2015; Barekat等人 。2016; Chakrabarti等人，2016; Gelino等人，2016）。 SA本身很简单， 然而，许多小细节可能会对其实验的有效性和随后的解释产生相当大的影响。 在这里，我们提供SA技术的详细更新，并解释如何捕捉Smurf，同时避免最常见的实验谬误。
【背景】Smurf分析（SA）基于（Wong等人，2009）中描述的果蝇饲养分析。该测定法通过摄入未被消化道吸收的蓝色染料来评估食物摄入量，从而允许直接定量。对于SA来说，这个特定的蓝色染料不能通过一个完整的肠屏障，因为它的读数是全身着色（这里是蓝色）。这种性质允许直接评估肠道通透性，已经显示其随着年龄的增长而增加（Rera等人，2011和2012）。
正如最近在Rera等人（2018）中所讨论的那样，Smurf分析不仅是评估体内肠渗透性的简单方法，而且也是评估广泛生物体中个体的生理年龄。因此，它允许以新颖的方法来研究在老化个体中发生的各种事件（Tricoire和Rera，2015; ...
|
|
|
| Visualization of Intracellular Tyrosinase Activity in vitro
|
|
Author:
Date:
2016-04-20
[Abstract] Melanocytes produce the melanin pigments in melanosomes and these organelles protect the skin against harmful ultraviolet rays. Tyrosinase is the key cuproenzyme which initiates the pigment synthesis using its substrate amino acid tyrosine or L-DOPA (L-3, 4-dihydroxyphenylalanine). Moreover, the activity of tyrosinase directly correlates to the cellular pigmentation. Defects in tyrosinase transport to melanosomes or mutations in the enzyme or reduced intracellular copper levels result in loss of tyrosinase activity in melanosomes, commonly observed in albinism. Here, we describe a method to ...
[摘要] 黑素细胞在黑素体中产生黑色素，这些细胞器保护皮肤免受有害的紫外线。 酪氨酸酶是使用其底物氨基酸酪氨酸或L-DOPA（L-3,4-二羟基苯丙氨酸）引发颜料合成的关键铜酶蛋白酶。 此外，酪氨酸酶的活性与细胞色素沉着直接相关。 酪氨酸酶转运到黑素体中的缺陷或酶中的突变或降低的细胞内铜水平导致黑素体中酪氨酸酶活性的丧失，通常在白化病中观察到。 在这里，我们描述了一种方法来检测小鼠黑素细胞中酪氨酸酶的细胞内活性。 该协议将使存在于细胞内囊泡或细胞器（包括黑素体）中的活性酪氨酸酶可视化。
|
|
|