| Teratoma Formation Assay for Assessing Pluripotency and Tumorigenicity of Pluripotent Stem Cells
|
|
Author:
Date:
2017-08-20
[Abstract] Pluripotent stem cells such as induced pluripotent stem cells (iPSCs) and embryonic stem cells (ESCs) form teratomas when transplanted into immunodeficient mice. As teratomas contain all three germ layers (endoderm, mesoderm, ectoderm), teratoma formation assay is widely used as an index of pluripotency (Evans and Kaufman, 1981; Hentze et al., 2009; Gropp et al., 2012). On the other hand, teratoma-forming tumorigenicity also represents a major risk factor impeding potential clinical applications of pluripotent stem cells (Miura et al., 2009; Okano et al., ...
[摘要] 多能干细胞，如诱导多能干细胞（iPSCs）和胚胎干细胞（ESC），当移植到免疫缺陷小鼠时，形成畸胎瘤。由于畸胎瘤包含所有三个胚层（内胚层，中胚层，外胚层），畸胎瘤形成测定被广泛用作多能性的指标（Evans和Kaufman，1981; Hentze等，2009; Gropp等，2012）。另一方面，畸胎瘤形成致瘤性也是阻碍多能干细胞潜在临床应用的主要危险因素（Miura et al。，2009; Okano等，2013）。最近，我们报道了由于ES细胞表达的Ras（ERAS）和替代物，嫁接到非肥胖型糖尿病/严重联合免疫缺陷型（NOD / SCID）小鼠的睾丸中，从裸鼠睾丸衍生的iPSC缺乏畸胎瘤形成致瘤性阅读框（ARF）依赖于该物种特异性的肿瘤抑制机制（Miyawaki等，2016）。在这里，我们描述了将多能干细胞移植到NOD / SCID小鼠的睾丸中以产生用于评估多能性和致瘤性的畸胎瘤的方法。
【背景】iPSCs和ESC用于再生医学细胞移植治疗中的应用。然而，当移植到免疫缺陷小鼠中时，这些细胞形成称为含有分化组织的畸胎瘤的肿瘤。因此，其畸胎瘤形成致瘤性的风险限制了其临床应用。几项研究报道了克服畸胎瘤形成肿瘤发生风险的方法（Itakura et al。，2017; Vazquez-Martin et ...
|
|
|
| Differentiation of Human Induced Pluripotent Stem Cells (iPS Cells) and Embryonic Stem Cells (ES Cells) into Dendritic Cell (DC) Subsets
|
|
Author:
Date:
2017-08-05
[Abstract] Induced pluripotent stem cells (iPS cells) are engineered stem cells, which exhibit properties very similar to embryonic stem cells (ES cells; Takahashi and Yamanaka, 2016). Both iPS cells and ES cells have an extraordinary self-renewal capacity and can differentiate into all cell types of our body, including hematopoietic stem/progenitor cells and dendritic cells (DC) derived thereof. This makes iPS cells particularly well suited for studying molecular mechanisms of diseases, drug discovery and regenerative therapy (Grskovic et al., 2011; Bellin et al., 2012; Robinton and ...
[摘要] 诱导的多能干细胞（iPS细胞）是工程干细胞，其表现出与胚胎干细胞（ES细胞，Takahashi和Yamanaka，2016）非常相似的性质。 iPS细胞和ES细胞都具有非凡的自我更新能力，可以分化成我们身体的所有细胞类型，包括造血干细胞/祖细胞和源自其的树突状细胞（DC）。这使得iPS细胞特别适用于研究疾病，药物发现和再生治疗的分子机制（Grskovic等人，2011; Bellin等人，2012; Robinton和Daley，2012）。
＆NBSP; DC是免疫系统的主要抗原呈递细胞，因此它们是调节和引导免疫应答的关键参与者（Merad等人，2013）。 DC巡逻外周和界面组织（例如，肺，肠和皮肤）以检测入侵的病原体，并且在激活时，它们迁移到淋巴结以激活和引发淋巴细胞。
＆NBSP; DC包含具有功能专门子集的表型异质家族（Schlitzer和Ginhoux，2014）。通常，经典DC（cDC）和浆细胞样DC（pDC）是分别表现出典型的和等离子体细胞样的DC形态。 cDC识别许多病原体并在激活后分泌促炎细胞因子，而pDC专门检测细胞内病原体并分泌I型干扰素（Merad等，2013; Schlitzer和Ginhoux，2014）。在被称为CD141 Clec9a + cDC1和CD1c + ...
|
|
|
| Implantation of Human Peripheral Corneal Spheres into Cadaveric Human Corneal Tissue
|
|
Author:
Date:
2017-07-20
[Abstract] Stem and progenitor cells isolated from human limbal tissue can be cultured in vitro as spheres. These spheres have potential for use as transplantable elements for the repopulation of corneal tissue (Mathan et al., 2016). Herein we describe the detailed protocol for the implantation of human corneal spheres into cadaveric human corneal tissue. This protocol describes the procedure for sphere formation and culture, preparation of tissue for sphere implantation, corneal limbus microsurgery and sphere implantation.
[摘要] 可以将从人角膜缘组织分离的茎细胞和祖细胞作为球体体外培养。 这些球体有可能用作角膜组织再造的可移植元件（Mathan等人，2016）。 这里我们描述了将人角膜球植入尸体人角膜组织的详细方案。 该协议描述了球形成和培养的过程，球体植入组织的制备，角膜缘显微外科手术和球体植入。
【背景】以前的研究集中在隔离角膜缘细胞，这些细胞完全是上皮细胞（角膜缘干细胞）或基质（角质细胞祖细胞），以破译他们在角膜内稳态和伤口修复中的各自角色。 该方案旨在通过其在培养物中形成球体的功能能力来分离角膜缘细胞，并且其本质将包括上皮和间质的多种细胞，其有助于角膜缘的形成。 在分离这些球体之后，我们正在调查其在植入后角膜修复中的潜在用途。 在这里，我们描述了一种用于将这些球体植入人角膜组织和下游分析的体外手术方案。
|
|
|