| Myeloid Progenitor Transformation Assay
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Author:
Date:
2017-12-05
[Abstract] Numerous oncogenes have been identified to cause leukemia. For example, chromosomal translocation generates various fusion genes of the mixed-lineage leukemia (MLL) gene and a partner gene in leukemia, whose gene products transform primary myeloid progenitors into an immortalized state. To characterize the transforming ability of leukemic oncogenes, researchers in the field have developed an ex vivo murine myeloid transformation assay using retroviral gene transduction and its protocol has been improved over the past 10 years. Here, we provide the detailed procedure for this ...
[摘要] 许多致癌基因已被确定为导致白血病。 例如，染色体易位在白血病中产生混合谱系白血病（MLL ）基因和伴侣基因的各种融合基因，其基因产物将原始骨髓祖细胞转化为永生状态。 为了表征白血病癌基因的转化能力，本领域的研究人员已经利用逆转录病毒基因转导开发了一种离体小鼠骨髓转化试验，其方案在过去的10年中得到了改进。 在这里，我们提供了这个检测的详细程序。
【背景】染色体易位产生多种导致白血病的MLL融合基因（Meyer等人，2017）。野生型混合谱系白血病（MLL）蛋白质起着转录调节剂的作用，其在造血不成熟祖细胞中增强包括同源框（homoxox（Hox））基因在内的一组基因的表达（Jude等。，2007）。在正常造血期间，Hox基因在干/祖细胞部分中表达，但在分化过程中转录下调（Somervaille和Cleary，2006; Yokoyama等人， 2013年）;然而，MLL融合蛋白组成性地上调其靶基因并阻断分化以在离体培养条件下建立永生状态。最近，我们报道了MLL-ENL和MLL-AF10融合蛋白招募AF4以激活转录并且还募集DOT1L复合物以维持相同靶基因的转录以有效地转化造血祖细胞（Okuda等人， ...
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| In vivo Leukemogenesis Model Using Retrovirus Transduction
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Author:
Date:
2017-12-05
[Abstract] Various genetic alterations such as chromosomal translocation cause leukemia. For examples, gene rearrangements of the mixed-lineage leukemia (MLL) gene generate MLL fusion genes, whose products are potent oncogenic drivers in acute leukemia. To better understand the mechanism of disease onset, several murine leukemia models using retroviral gene transduction, xenograft, or Cre-mediated chromosomal translocation have been developed over the past twenty years. Particularly, a retroviral gene transduction-mediated murine leukemia model has been frequently used in the leukemia ...
[摘要] 各种基因改变如染色体易位导致白血病。 例如，混合谱系白血病（MLL ）基因的基因重排产生MLL 融合基因，其产物是急性白血病中有效的致癌驱动因子。 为了更好地理解疾病发生的机制，过去二十年来已经开发了几种使用逆转录病毒基因转导，异种移植或Cre介导的染色体易位的鼠白血病模型。 特别地，逆转录病毒基因转导介导的鼠白血病模型已经在白血病研究领域中经常使用。 在这里，我们描述这个模型的详细协议。
【背景】基因重排产生混合谱系白血病（MLL ）融合基因，导致高度侵袭性的急性白血病。 MLL重排往往伴随着少量额外的遗传改变和不良的临床结果（Andersson等人，2015）。野生型MLL增强和维持包括同源框（Hox）基因在内的一部分基因的表达，以刺激未成熟祖细胞的扩增（Jude等人，2007年）。在未成熟的祖细胞/干细胞组分中，Hoxa9和emis1的表达最高，但随着细胞分化逐渐下降，并最终在终末分化的细胞组分中减少（Somervaille和Cleary，2006; Yokoyama et al。 ，2013）。 MLL融合蛋白组成性地上调包括Hoxa9和Meis1在内的靶基因的表达，使未成熟的祖细胞永生化，并在体内引起白血病 （Ayton和Cleary，2003; ...
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| Induction and Quantification of Patulin Production in Penicillium Species
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Author:
Date:
2017-06-05
[Abstract] Patulin, a worldwide regulated mycotoxin, is primarily produced by Penicillium and Aspergillus species during fruit spoilage. Patulin contamination is a great concern with regard to human health because exposure of the mycotoxin can result in severe acute and chronic toxicity, including neurotoxic, mutagenic, and immunotoxic effects. Penicillium expansum is known as the main producer of patulin. This protocol addresses the cultivation procedure of P. expansum under patulin permissive conditions and describes the method of collection and detection of patulin.
[摘要] Patulin是世界范围内调节的真菌毒素，主要是在水果腐败期间由青霉菌和曲霉菌种生产的。蛋白污染是人类健康的重大问题，因为霉菌毒素的暴露会导致严重的急性和慢性毒性，包括神经毒性，诱变性和免疫毒性作用。青霉素被称为patulin的主要生产者。该协议涉及到P的培育程序。膨化条件下的膨胀，并描述了patulin的收集和检测方法。
背景 丙氨酸是一种聚酮内酯霉菌毒素，是由几种真菌，包括青霉菌，曲霉菌和其他物种产生的。其中，广西青霉菌是一种着名的收获后病原体，在贮存期间引起了果皮果实的腐烂，是主要的生产者。由于毒素引起的严重急性和慢性作用，苹果产品中的蛋白酶水平受到极大的关注。因此，世界上许多国家的食品中的蛋白质水平有限。欧盟委员会（2006年）确定了苹果汁（50μg/ kg），固体苹果产品（25μg/ kg），最重要的是果实婴儿食品（10μg/ kg）的最高允许水平，因为儿童苹果衍生产品的主要消费者。
＆NBSP;近年来对青霉素的研究主要集中在调节蛋白质生产的环境因素，patulin生物合成的分子基础和patulin的生物降解。在这些研究中，嘌呤产生的诱导和定量的方法是重要的。水果中的蛋白质分析通常遵循AOAC方法995.10（Brause等人，1996）。用果胶酶处理后，用醋酸乙酯从果实的腐烂部分提取白蛋白。已经开发了许多用于测量patulin的方法，例如TLC，质谱和气相色谱/质谱。现在，使用紫外光检测（HPLC-UV）的高效液相色谱法是最常用的方法（Baert等人，2007）。 ...
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