| Mouse Müller Cell Isolation and Culture
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Author:
Date:
2017-08-05
[Abstract] Müller cells are the major supportive and protective glial cells across the retina. Unlike in fish, they have lost the capacity to regenerate the retina in mammals. But, mammalian Müller cells still retain certain retinal stem cell properties with various degree of self-renewal and differentiation potentials, and thereby held a merit in cell-based therapies for treating retinal degeneration diseases. In our laboratory, we use an enzymatic procedure to isolate, purify, and culture mouse Müller cells.
[摘要] Müller细胞是视网膜上的主要支持和保护性胶质细胞。 与鱼类不同，它们已经失去了在哺乳动物中再生视网膜的能力。 但是，哺乳动物Müller细胞仍然保留了具有不同程度的自我更新和分化潜能的某些视网膜干细胞特性，从而在基于细胞的疗法中治疗视网膜变性疾病具有优点。 在我们的实验室，我们使用酶法来分离，纯化和培养小鼠Müller细胞。
【背景】Müller胶质细胞是视网膜的主要谱系，其功能是通过神经营养因子的合成，神经递质的摄取和再循环，离子的空间缓冲和血液视网膜屏障的维持来维持视网膜稳态（Bringmann等人，，2006; De Melo Reis等人，2008）。 Müller神经胶质细胞作为鱼类中的视网膜祖细胞和干细胞，在有限的范围内作为鸟类（Vihtelic和Hyde，2000; Fischer and Reh，2001）。但是，哺乳动物Müller细胞已经失去了再生视网膜的能力，尽管仍然保留成体干细胞的某些性质，例如视网膜损伤时的增殖。研究恢复哺乳动物Müller细胞丧失能力以修复视网膜损伤和理解底层机制的研究在与模型动物视网膜分离的原代细胞的实验室进行。蛋白水解酶广泛用于Müller细胞解离，木瓜蛋白酶的损伤较小，比其他蛋白酶更有效。 ...
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| A Murine Orthotopic Allograft to Model Prostate Cancer Growth and Metastasis
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Author:
Date:
2017-02-20
[Abstract] Prostate cancer is one of the most common cancers in men in the United States. Comprehensive understanding of the biology contributing to prostate cancer will have important clinical implications. Animal models have greatly impacted our knowledge of disease and will continue to be a valuable resource for future studies. Herein, we describe a detailed protocol for the orthotopic engraftment of a murine prostate cancer cell line (Myc-CaP) into the anterior prostate of an immune competent mouse.
[摘要] 前列腺癌是美国男性最常见的癌症之一。对前列腺癌生物学的全面了解将具有重要的临床意义。动物模型大大影响了我们对疾病的了解，并将继续成为未来研究的宝贵资源。在这里，我们描述了将一种鼠前列腺癌细胞系（Myc-CaP）原位植入免疫能力小鼠前列腺的详细方案。
背景 由于转移的癌症的一小部分，前列腺癌是男性癌症死亡的主要原因。然而，驱动局部肿瘤发展和进展为转移性疾病的遗传和分子因素仍未完全了解。基因工程小鼠（GEM）模型和前列腺癌的异种移植模型都有助于我们对前列腺癌遗传学的了解（Ittmann等人，2013; Park等人，2010）。通过前列腺特异性转基因过表达如Hi-Myc小鼠（Ellwood-Yen等人，2003）或通过前列腺特异性缺失例如在Pten中的遗传操作， - 小鼠（Wang等人，2003）是有利的，因为它模拟了免疫能力小鼠的器官微环境中的肿瘤发展和进展。转移性前列腺癌的发展在这些GEM模型中是可变的，其中一些低频率, 其他模型如TRAMP（转基因腺癌小鼠前列腺）（reenberg等，1995）和Hi-Myc / Pten < -=""> （Hubbard等人，2016）。尽管他们对前列腺癌研究有很大的实用价值，但进一步的遗传操纵GEM模型是困难，耗时和昂贵的。为了克服这些局限性，研究人员依赖于人类细胞系的皮下和原位异种移植物。细胞系可以以多种方式在体外进行遗传操作。虽然皮下异种移植物由于其易于注射和监测而是有利的，但原位异种移植物更好地概括了可能影响药物敏感性的局部肿瘤微环境（Wilmann等人，1992; ...
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| Neuron Culture from Mouse Superior Cervical Ganglion
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Author:
Date:
2014-01-20
[Abstract] The rodent superior cervical ganglion (SCG) is a useful and readily accessible source of neurons for studying the mechanisms of sympathetic nervous system (SNS) development and growth in vitro. The sympathetic nervous system (SNS) of early postnatal animals undergoes a great deal of remodeling and development; thus, neurons taken from mice at this age are primed to re-grow and establish synaptic connections after in situ removal. The stereotypic location and size of the SCG make it ideal for rapid isolation and dissociation. The protocol described here details the ...
[摘要] 啮齿动物上级子宫颈神经节（SCG）是一种有用且易于获取的神经元来源，用于研究交感神经系统（SNS）体外发育和生长的机制。 早期出生后动物的交感神经系统（SNS）经历了大量的重塑和发育; 因此，在这个年龄的小鼠中取出的神经元被引发再生长并在原位移除后建立突触连接。 SCG的刻板位置和尺寸使其成为快速隔离和解离的理想选择。 这里描述的方案详述了SCG神经元的解剖，培养和分化的要求。 该方案适用于从晚期胚胎妊娠至大约出生后第3天培养神经元。下面讨论的培养技术利用玻璃盖玻片进行固定细胞的显微镜检查。
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