| High-throughput Microscopic Analysis of Salmonella Invasion of Host Cells
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Author:
Date:
2018-09-20
[Abstract] Salmonella is a Gram-negative bacterium causing a gastro-enteric disease called salmonellosis. During the first phase of infection, Salmonella uses its flagella to swim near the surface of the epithelial cells and to target specific site of infection. In order to study the selection criteria that determine which host cells are targeted by the pathogen, and to analyze the relation between infecting Salmonella (i.e., cooperation or competition), we have established a high-throughput microscopic assay of HeLa cells sequentially infected with fluorescent ...
[摘要] 沙门氏菌是革兰氏阴性细菌，引起称为沙门氏菌病的胃肠疾病。在感染的第一阶段，沙门氏菌使用其鞭毛在上皮细胞表面附近游泳并靶向特定的感染部位。为了研究确定哪种宿主细胞被病原体靶向的选择标准，并分析感染沙门氏菌（ ie ，合作或竞争）之间的关系，我们有建立了对荧光细菌依次感染的HeLa细胞的高通量显微镜检测。使用自动化图像分析管道，我们定量表征了感染和未感染细胞的众多参数。基于此，我们建立了一个预测模型，使我们能够识别宿主细胞易受感染的参数。我们发现宿主细胞易损性有两个来源：病原体诱导的细胞易感性从沙门氏菌摄取中出现并持续存在于感染过程的后期阶段;以及与细胞固有属性相关的宿主细胞固有的脆弱性，例如局部细胞拥挤和胆固醇含量。我们的方法基于形态学或分子宿主细胞参数预测单层上皮细胞中沙门氏菌感染的概率。在这里，我们提供了工作流程的详细描述，包括基于计算机的分析管道。我们的方法有可能应用于研究宿主 - 病原体相互作用的其他组合。
【背景】鼠伤寒沙门氏菌血清型鼠伤寒沙门氏菌通过摄入受污染的食物或水感染宿主，引起沙门氏菌病。一旦细菌到达肠道的远端回肠，它们就会侵入广泛的宿主细胞，包括肠上皮细胞（Watson和Holden，2010）。在宿主细胞入侵的第一阶段，沙门氏菌选择其目标，使用其鞭毛游泳并扫描上皮表面（Misselwitz et ...
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| Dye Labeling of Live Nippostrongylus brasiliensis Larvae for Visualization in Host Tissue
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Author:
Date:
2016-02-20
[Abstract] Visualization of the interaction between parasitic nematodes and their host enables a better understanding of the development of the nematode during the infectious stages of its life cycle and of the effects of host response on nematode integrity in tissues. Appropriate live imaging of these nematode/host interactions, to date has been hindered by the lack of appropriate molecular tools or efficient labeling agents. Here, we present techniques for the live labeling of the nematode parasite Nippostrongylus brasiliensis (N. brasiliensis) that allows visualization of the ...
[摘要] 寄生线虫与其宿主之间的相互作用的可视化使得能够更好地理解线虫在其生命周期的感染阶段期间的发展以及宿主对组织中线虫完整性的反应的影响。 这些线虫/宿主相互作用的适当的活体成像迄今为止由于缺乏合适的分子工具或有效的标记试剂而受到阻碍。 在这里，我们提出了线虫寄生虫（Nippostrongylus brasiliensis）（ N。brasiliensis ）的活标签的技术，其允许在小鼠宿主中可视化寄生虫长达24小时。 外鞘可以用CFSE标记，允许感染性幼虫被鉴定和跟踪，直到呕吐的阶段。 感染性寄生虫的内部标记可以通过摄取NY微球来进行。 蠕虫可以继续被识别长达24小时以下的exshement。 这应适用于其他寄生线虫。
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