| Isolation of Tumor Cells Based on Their Distance from Blood Vessels
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Author:
Date:
2020-05-20
[Abstract] Differential exposure of tumor cells to microenvironmental cues greatly impacts cell phenotypes, raising a need for position based sorting of tumor cells amenable to multiple OMICs and functional analyses. One such key determinant of tumor heterogeneity in solid tumors is its vasculature. Proximity to blood vessels (BVs) profoundly affects tumor cell phenotypes due to differential availability of oxygen, gradient exposure to blood-borne substances and inputs by angiocrine factors. To unravel the whole spectrum of genes, pathways and phenotypes impacted by BVs and to determine spatial domains ...
[摘要] [摘要 ] 肿瘤细胞的差分暴露于微环境线索大大IM 协议小号细胞表型，提高基于需要位置的肿瘤细胞的分选适合于多个组学和功能分析。实体瘤中肿瘤异质性的此类关键决定因素之一是其脉管系统。邻近血管（的BV）深刻affec TS 肿瘤细胞表型是由于氧气的可利用性不同，对血源性物质的梯度暴露以及血管分泌因子的输入所致。为了揭示受BV影响的基因，通路和表型的整个谱图，并确定血管影响的空间域，我们开发了一种根据肿瘤细胞与BV的相对距离进行分类的方法。此处使用胶质母细胞瘤（GBM）模型示例的程序基于静脉内注射，自由扩散的荧光染料的差异摄取，该染料允许分离位于适合于后续OMIC和功能分析的不同连续微环境中的无基质肿瘤细胞。这种可靠，易于使用，具有成本效益的策略可以扩展到所有实体瘤，以研究脉管系统的影响或缺乏脉管系统的影响。
[背景 ] 在充足的血液供应肿瘤依赖已经提供了一种用于抗血管生成的癌症治疗的理由（Carmeliet和耆那，2000; Vasudev 等人，2013年）。传统上归因于氧气和其他血源性物质的提供，肿瘤脉管系统在肿瘤生物学中的作用最近扩展到包括由分泌的内皮产生的血管分泌因子施加的非灌注依赖性旁分泌输入（Butler 等人，2010； Beck 等人，2011； Lu 等人，2013），以及通过相互Notch信号传导介导的肿瘤-BV直接接触（Cao ...
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| VLA-4 Affinity Assay for Murine Bone Marrow-derived Hematopoietic Stem Cells
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Author:
Date:
2017-02-20
[Abstract] Hematopoietic stem cells (HSCs) are defined by their functional ability to self-renew and to differentiate into all blood cell lineages. The majority of HSC reside in specific anatomical locations in the bone marrow (BM) microenvironment, in a quiescent non motile mode. Adhesion interactions between HSCs and their supporting BM microenvironment cells are critical for maintaining stem cell quiescence and protection from DNA damaging agents to prevent hematology failure and death. Multiple signaling proteins play a role in controlling retention and migration of bone marrow HSCs. Adhesion ...
[摘要] 造血干细胞（HSC）由其自我更新的功能能力定义，并分化成所有血细胞谱系。大多数HSC位于骨髓（BM）微环境中的特定解剖位置，处于静止非运动模式。 HSCs与其支持的BM微环境细胞之间的粘附相互作用对于维持干细胞静止和保护免受DNA损伤因子阻止血液学失败和死亡至关重要。多重信号蛋白在控制骨髓HSCs的保留和迁移中起重要作用。粘附分子参与调节造血和干细胞和祖细胞BM保留，迁移和发育的两个过程。干细胞从骨髓移动到骨髓的机制尚未完全阐明，仍然是深入研究的对象。一个重要的方面是修饰干细胞保留，迁移和发育所需的干细胞和祖细胞的粘附分子的表达和亲和力。粘附力通过粘附分子的表达，亲和力和亲合力来调节。亲和力调节与分子结合识别和结合强度有关。在这里，我们描述了在我们的研究中使用的体外 FACS测定来研究整联蛋白α4亚类β1亚单位的表达，亲和力和功能也称为VLA-4）用于小鼠骨髓保留EPCR +长期复制HSC（LT-HSC）（Gur-Cohen等人，2015）。背景整合素是介导细胞和细胞 - ...
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| Infectious Focus Assays and Multiplicity of Infection (MOI) Calculations for Alpha-herpesviruses
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Date:
2014-11-20
[Abstract] Titration of viral stocks is a critical process before any experimental use of the virus. Here we describe an infectious focus assay for several alphaherpesviruses, a titration method for fluorescently labeled viruses, based on the original plaque assay. In addition, the calculation of multiplicity of infection (MOI) is presented.
[摘要] 病毒储液的滴定是在病毒的任何实验性使用之前的关键过程。 在这里我们介绍几种alphaherpesviruses的感染焦点测定法，基于原始斑块测定荧光标记病毒的滴定方法。 此外，提出了感染复数（MOI）的计算。
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