|
Author:
Date:
2018-05-05
[Abstract] In this protocol, we describe a method to monitor cell proliferation and death by live-cell imaging of propidium iodide (PI)-stained adherent mammalian cells. PI is widely used to assess cell death. However, it is usually used in end-point assays. Recently, we implemented the use of PI for real-time cell death assessment by automated imaging. Cells are seeded in a 96-well format, and after attachment, the treatments are added directly to the wells together with PI. Thereafter, cells are subjected to automated time-lapse imaging and quantification by computer software. Combined analyses of ...
[摘要] 在该协议中，我们描述了通过碘化丙啶（PI）染色的贴壁哺乳动物细胞的活细胞成像来监测细胞增殖和死亡的方法。 PI广泛用于评估细胞死亡。 但是，它通常用于终点检测。 最近，我们通过自动成像实现了PI的实时细胞死亡评估。 将细胞以96孔形式接种，并且在附着后，将处理与PI一起直接加入到孔中。 之后，通过计算机软件对细胞进行自动延时成像和定量。 相衬和荧光图像的组合分析允许评估对细胞增殖的处理效果以及细胞死亡的程度和动力学。
【背景】多种基于细胞的测定可用于确定细胞死亡，但其中大多数测定包括MTT（溴化3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基四唑鎓）测定，晶蓝染色，和各种基于流式细胞术的方法，都有作为终点分析的限制。最近，我们使用自动荧光成像系统（Essen Bioscience的IncuCyte ZOOM）（Sehgal等人，2017）将碘化丙啶（PI）用于细胞死亡的活细胞评估。通过对相差图像进行组合分析，可以同时检测细胞抑制和细胞毒性效应。这种方法证明是可靠和可重复的，以及非常简单和便宜。在我们最近的出版物中，我们将它用于三种不同的癌细胞系（LNCaP，PC3和MCF7），以有效地确定和比较ER Ca 2 +泵抑制剂毒胡萝卜素各种药物类似物（Tg ）（Sehgal et ...
|