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Sodium tetraborate decahydrate

十水合四硼酸钠

公司名称: Sigma-Aldrich
产品编号: B9876
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Mutant Huntingtin Secretion in Neuro2A Cells and Rat Primary Cortical Neurons
Author:
Date:
2018-01-05
[Abstract]  Quantitative analysis of proteins secreted from the cells poses a challenge due to their low abundance and the interfering presence of a large amount of bovine serum albumin (BSA) in the cell culture media. We established assays for detection of mutant huntingtin (mHtt) secreted from Neuro2A cell line stably expressing mHtt and rat primary cortical neurons by Western blotting. Our protocol is based on reducing the amounts of BSA in the media while maintaining cell viability and secretory potential, and concentrating the media prior to analysis by means of ultrafiltration. [摘要]  由细胞分泌的蛋白质的定量分析由于它们的丰度低和在细胞培养基中干扰大量牛血清白蛋白(BSA)的存在而提出挑战。 我们建立检测突变亨廷顿蛋白(mHtt)检测分泌Neuro2A细胞系稳定表达mHtt和大鼠原代皮层神经元蛋白质印迹。 我们的方案是基于降低培养基中BSA的量,同时保持细胞活力和分泌潜能,并在通过超滤分析之前浓缩培养基。


【背景】许多蛋白质通过各种分泌途径从细胞分泌到细胞外环境中。这些途径包括在ER-高尔基体 - 质膜途径之后的常规分泌途径(Lee等,2004)和多个非常规途径,例如溶酶体胞吐作用,穿过质膜的易位和外泌体以及胞外体释放(Zhang和Schekman,2013)。为了研究这些途径,经常需要分析培养细胞分泌的蛋白质进入培养基。蛋白质可以游离形式分泌,也可以与胞膜结构如胞外体和外泌体结合(Zhang and ...

Optogenetic Stimulation and Recording of Primary Cultured Neurons with Spatiotemporal Control
Author:
Date:
2017-06-20
[Abstract]  We studied a network of cortical neurons in culture and developed an innovative optical device to stimulate optogenetically a large neuronal population with both spatial and temporal precision. We first describe how to culture primary neurons expressing channelrhodopsin. We then detail the optogenetic setup based on the workings of a fast Digital Light Processing (DLP) projector. The setup is able to stimulate tens to hundreds neurons with independent trains of light pulses that evoked action potentials with high temporal resolution. During photostimulation, network activity was monitored ... [摘要]  我们研究了文化中的皮层神经元网络,并开发了一种创新的光学装置,以空间和时间精确度激发大量神经元。 我们首先描述如何培养表达channelorhodopsin的原代神经元。 然后,我们将根据快速数字光处理(DLP)投影机的工作原理来详细说明光遗传设置。 该设置能够用独立的光脉冲训练数十到数百个神经元,以高时间分辨率诱发动作电位。 在光刺激期间,使用多达4个神经元的膜片钳记录监测网络活动。 该实验非常适合研究复杂的网络动力学或生物过程,如神经元网络中的可塑性或体内平衡,当子群体由其特征(相关性,速率和大小)进行精细控制的不同刺激激活时。
【背景】光致遗传学提供以毫秒精度控制神经元活动的平均值。然而,神经元通常通过同时激活整个群体的光的闪光或通过在整个视野上的时间调制强度的光同时激活(Boyden等人,2005)。然而,存在几种空间调节光并已被用于使谷氨酸不起作用的方法(Nawrot等人,2009)或激活表达神经元的通道视紫质(ChR2)(Guo等人,2009)(用于审查刺激神经元的可用方法具有空间和时间分辨率参见Anselmi等人,2015)。
为了获得刺激的空间控制,第一种可能性是使用激光并将其光束快速移动到不同位置。例如,通过用声光偏转器偏转激光束已经实现了在不同树枝状位置处的谷蛋白解冻(Shoham等人,2005)。只有我们在有限的区域内足够缓慢地调节光强度,这个策略才可能是可行的。或者,可以使用相位或强度的光调制器来实现光的空间图案。基于相位调制的全息技术允许以三维空间精度获得图像,但是可以以仅100Hz的速率显示图案(Papagiakoumou等人,2010)。如果二维图案是足够的,则可以通过将投影仪或阵列的LED放置在样品的共轭平面中来简单地获得强度调制(Farah等人,2007; ...

Fluoro-Jade B Staining for Neuronal Cell Death
Author:
Date:
2016-01-05
[Abstract]  Fluoro-Jade is a fluorescent derivative used for histological staining of degenerating neurons. This technique is simple and sensitive enough to label distal dendrites, axons, axon terminals as well as neuronal bodies. Fluoro-Jade has excitation and emission peak of 480 and 525 nanometer respectively. It can be visualized using a fluorescein/FITC filter. Some reports have demonstrated that Fluoro-Jade can also be useful to detect glial cell death (Anderson et al., 2013; Damjanac et al., 2007). [摘要]  Fluoro-Jade是用于退化神经元的组织学染色的荧光衍生物。 这种技术是简单和足够敏感到标记远端树突,轴突,轴突终端以及神经元体。 翡翠的激发和发射峰分别为480和525纳米。 它可以使用荧光素/FITC过滤器可视化。 一些报道已经证明氟 - 玉也可以用于检测胶质细胞死亡(Anderson等人,2013; Damjanac等人,2007)。

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