{{'Search' | translate}}
 

AKTA Pure Chromatography System

公司名称: Cytiva
产品编号: AKTA Pure
Bio-protocol()
Company-protocol()
Other protocol()

A mant-GDP Dissociation Assay to Compare the Guanine Nucleotide Binding Preference of Small GTPases
Author:
Date:
2021-01-20
[Abstract]  

Small GTPases are cellular switches that are switched on when bound to GTP and switched off when bound to GDP. Different small GTPase proteins or those with mutations may bind to GTP or GDP with different relative affinities. However, small GTPases generally have very high affinities for guanine nucleotides, rendering it difficult to compare the relative binding affinities for GTP and GDP. Here we developed a method for comparing the relative binding strength of a protein to GTP and GDP using a mant-GDP dissociation assay, whereby the abilities of GTP and GDP to induce the dissociation of

...
[摘要]  [摘要]小型GTPases是蜂窝交换机,绑定到GTP时打开,绑定到GDP时关闭。不同的小GTPase蛋白或具有突变的蛋白可能以不同的亲和力与GTP或GDP结合。然而,小的GTP酶通常具有非常高的鸟嘌呤核苷酸亲和力,使得难以比较GTP和GDP的相对结合亲和力。在这里,我们开发了一种方法,使用以下方法比较蛋白质与GTP和GDP的相对结合强度 mant-GDP解离分析,比较了GTP和GDP诱导绑定的mant-GDP解离的能力。这种平衡类型测定简单,经济并且比获得每种蛋白质对GDP和GTP的亲和力要快得多。Ť他GDP / GTP偏好值获得是用于比较的相对GTP有用/ GDP结合偏好小号不同GTP酶或不同的突变体,尽管这不是真正的GDP / GTP亲和力比(而是比的估计)。

[背景]小GTP酶(也称为小G蛋白)是一组功能上重要的大分子,由于其固有的水解酶活性,它们可以与GTP结合并水解为GDP 。在人类,米矿比一百种不同的小GTP酶分为五个家庭,即RAS,卢,冉,拉布和Arf的,根据其序列,结构,和功能(Wennerberg等,2005) 。

...

A One-enzyme RT-qPCR Assay for SARS-CoV-2, and Procedures for Reagent Production
Author:
Date:
2021-01-20
[Abstract]  

Given the scale of the ongoing COVID-19 pandemic, the need for reliable, scalable testing, and the likelihood of reagent shortages, especially in resource-poor settings, we have developed an RT-qPCR assay that relies on an alternative to conventional viral reverse transcriptases, a thermostable reverse transcriptase/DNA polymerase (RTX) (Ellefson et al., 2016). Here we show that RTX performs comparably to the other assays sanctioned by the CDC and validated in kit format. We demonstrate two modes of RTX use – (i) dye-based RT-qPCR assays that require only RTX polymerase, and (ii) TaqMan

...
[摘要]  [摘要]鉴于持续进行的COVID-19大流行的规模,可靠,可扩展的测试需求以及试剂短缺的可能性(尤其是在资源匮乏的环境中),我们开发了一种n RT-qPCR分析方法,该方法依赖于其他方法与常规病毒逆转录酶相比,热稳定的逆转录酶/ DNA聚合酶(RTX)(Ellefson等,2016)。在这里,我们显示RTX与CDC认可并以试剂盒形式验证的其他检测方法具有可比性。我们演示了两种RTX使用模式-(i)仅需要RTX聚合酶的基于染料的RT-qPCR分析,以及(ii)使用RTX和Taq DNA聚合酶组合的TaqMan RT-qPCR分析(因为RTX核酸外切酶不降级ea TaqMan探针)。我们还提供了纯化该替代试剂RTX的简单方法。我们预计,在资源匮乏或需要的地方,研究人员可以获取可用的构建体,并开始开发自己的测定方法,而不论它们存在的调控框架如何。


[背景]尽管已采用多种病毒检测方法来检测SARS-CoV-2感染,包括各种分子诊断和免疫诊断测试,但逆转录酶定量聚合酶链反应(RT-qPCR)仍然是主要且最敏感的方法SARS-CoV-2检测试验(D'Cruz等,2020 ; Tang等,2020 )。RT-qPCR的首要地位在很大程度上是因为基于抗体的测试以及快速核酸诊断平台(如Abbott ...

产品评论